脓毒症大鼠外周血单核细胞TLR4表达变化及TGF-β1干预作用的研究

摘要

目的：动态观察脓毒症大鼠外周血单核细胞TLR4表达变化及TGF-β1调节脓毒症的作用及机制。方法：清洁级雄性SD大鼠120只，随机分为对照组(随机分5组，每组8只)、脓毒症模型组及TGF-β1干预组，(各组再随机分5组，分别为脓毒症2h组、6h组、12h组、24h组、48h组)。脓毒症模型组及TGF-β1干预组以盲肠结扎穿孔法(CLP)建立脓毒症模型，脓毒症模型组于造模后0.5小时尾静脉注射生理盐水1ml，TGF-β1干预组于造模后0.5小时尾静脉注射TGF-β1(20ng/ml·250g)。利用流式细胞术检测外周血单核细胞表面TLR4表达变化，酶联免疫吸附分析法(ELISA)检测外周血TNF-α浓度变化并于相应时间点活杀大鼠取组织器官观察病理改变。结果：CLP术后2-12h TLR4在外周血单核细胞表面表达逐渐下降，12 h降至最低，此后表达升高，CLP术后6-12h与对照组相比表达明显降低。TGF-β1干预组TLR4在单核细胞表达较脓毒症模型组表达降低，CLP造模后2h、24h、48h差异均有统计学意义，外周血TNF-α浓度较脓毒症模型组明显升高，差异在各时间点均有统计学意义。TGF-β1干预组血清TNF-α浓度水平与单核细胞表达TLR4阳性率程度不相关。与脓毒症模型组相比，TGF-β1干预组肾脏、肺脏炎症损伤、组织细胞坏死加剧，在CLP术后24h最为明显。结论：外周血单核细胞TLR4表达下降主要发生在脓毒症后2-12小时内：TGF-β1能调节TLR4在外周血单核细胞上的表达变化，能促进脓毒症前炎症因子TNF-α生成，加剧肾脏、肺脏炎症损伤，但TGF-β1调节TNF-α的产生增加不是直接通过调节外周血单核细胞上TLR4表达变化实现的。