巢式PCR动态检测围手术期脊柱结核患者外周血MTB-DNA的初步研究

摘要

目的：通过巢式聚合酶链反应(polymerase chainreaction,PCR)检测脊柱结核患者围手术期外周血及病灶标本的结核分枝杆菌脱氧核糖核酸(mycobacteriumtubcrculosis desoxyribore nucleic acid,MTB-DNA)的IS6110基因表达,探索其在临床上快速诊断脊柱结核的应用价值;rn 方法：选择2008年5月2009年2月在南华大学附一医院住院的25例脊柱结核患者,分别采集术前1天、术后1天、术后7天、术后14天的外周血作为外周血实验组。从上述患者病灶中采取的脓液、肉芽组织25份作为病灶组织实验组。取自同期因非结核仅椎间盘突出而住院手术的25例患者的术后1天外周血25份及椎间盘髓核组织25份为对照组。采取巢式PCR检测各实验组及对照组标本中的MTB-DNA的IS6110基因及其含量及对25例外周血实验组脊柱结核患者进行血清结核抗体检测及病灶组织直接涂片抗酸染色找抗酸杆菌。rn 结果：巢式PCR检测外周血实验组中100份外周血标本及病灶组织组25份病灶组织标本中的MTB-DNA的IS6110基因,所有扩增产物均为阳性,阳性率为100%(100/100);巢式PCR检测对照组25例非结核患者的25份术后1天外周血标本及其25份椎间盘髓核组织共50份标本,仅1例假阳性,假阳性率为2%(1/50),异性为98%。南华大学附一医院检验科对25例外周血实验组脊柱结核患者进行血清结核抗体检测阳性率为56%,对病灶组织实验组25例脊柱结核患者进行病灶组织直接涂片抗酸染色找抗酸杆菌检测阳性率为32%,比较这三种检测方法的检测效果,巢式PCR明显优于血清结核抗体检测法及病灶组织直接涂片法(P<0.01)。rn 结论：根据IS6110基因设计两对特异性硫化修饰引物,结合高效保真聚合酶建立的巢式PCR检测结核分枝杆菌具有较高的灵敏度和特异性,对于临床上快速检测和诊断脊柱结核具有很好的实用价值。