芎芍胶囊对动脉粥样硬化兔血管内皮细胞功能的保护作用

摘要

目的：研究芎芍胶囊对实验性兔动脉粥样硬化（AS）血管内皮细胞功能的保护作用，并探讨其可能的机制。rn 方法：采用4F·Fogarty 导管剥脱损伤腹主动脉内皮后继喂高脂饲料的方法，复制兔节段性AS 模型。术后随机分为8组，即模型3 天组、2 周组、6 周组，单纯内皮损伤组，普罗布考组，芎芍胶囊小剂量组、大剂量组及正常对照组。除正常对照组及单纯内皮损伤组外均予高脂饲料喂养，采用硝酸还原酶法测定血清NO水平，免疫非平衡法测定血浆ET水平，原位杂交法测定兔腹主动脉壁一氧化氮合酶（NOS）mRNA和ETmRNA的表达，透射电镜观察内皮细胞的超微结构及扫描电镜观察内皮细胞的结构形态，观察药物对实验性兔AS 血管内皮细胞功能的影响。rn 结果：内皮损伤喂食高脂饲料后3 天，血浆ET-1 即明显升高，血清NO 开始下降，ET-1 随时间延长，逐渐升高，NO 逐渐下降，模型组3 天、2 周、6 周时ET-1水平及模型6 周时NO水平与正常对照组相比差异显著（P<0.05,P<0.01）；单纯内皮损伤组虽未喂食高脂饲料，但ET-1 仍显著升高，血清NO 下降，与正常对照组相比差异显著（P<0.01）；各药物组均能显著降低ET-1水平，升高NO水平，降低ET-1 以普罗布考为优，升高NO 以芎芍大剂量为著。原位杂交法测定兔腹主动脉壁NOSmRNA和ETmRNA的表达结果显示，正常组未见cNOS 及ET 阳性表达，各模型组及给药组cNOS 及ET 阳性表达主要见于内膜。模型3 天，内膜中仅有少量cNOS 及ET 阳性表达，模型2 周、6 周组及单纯内皮损伤组ET-1 阳性表达较多，cNOS 表达较少，各用药组可不同程度减少内膜中ET-1mRNA 阳性颗粒的表达，并使cNOSmRNA 表达增加，尤以芎芍大剂量组作用更明显。透射电镜观察结果显示，正常对照组内皮细胞连续完整，细胞间连接完好，模型3 天组镜下内膜严重受损，有的部位内皮细胞破坏或脱落，失去正常形态；模型2 周时，血管表面可见到不完整的内皮细胞，未见细胞间连接装置；6 周时，血管表面可见内皮细胞覆盖，内皮细胞胞浆内可见到空泡化的线粒体和扩张的内质网及较多的脂质颗粒，细胞间有较多的胶原纤维增生；单纯内皮损伤组内皮细胞受损，形态变圆，细胞间连接装置破坏；普罗布考组血管表面可见到内皮细胞，胞浆内有较大的空泡，细胞间连接装置不明显；芎芍胶囊大小剂量组血管表面均可降到内皮细胞覆盖，核呈椭圆形，小剂量组可见到细胞间连接装置。扫描电镜观察结果显示，正常对照组内皮细胞形态正常，排列整齐，细胞表面有微绒毛。模型3 天组，内皮细胞有的部位脱失，排列紊乱，有的内皮细胞严重受损，表面有血小板粘附；模型2 周组内膜粗糙，内皮细胞排列紊乱，表面有片状或条状粥样斑块，有些粥样斑块已向腔面溃破呈火山口状，细胞表面有血小板粘附；模型6 周及单纯内皮损伤组内皮细胞肿胀，排列紊乱，内膜粗糙更加明显，可见火山口样结构，细胞表面有红细胞、血小板粘附；各给药组内膜表面均较模型组光滑，内皮细胞表面均可见到短的微绒毛，但普罗布考组内皮细胞排列仍较紊乱，胞体肿胀，表面吸附有血小板、红细胞；芎芍小剂量组有的部位内皮细胞排列整齐，界限清晰，但胞体仍肿胀，并有火山口样结构；芎芍大剂量组细胞较整齐，细胞界限明显，少量细胞表面有火山口样结构。rn 结论：芎芍胶囊可显著升高血清NO水平，降低血浆ET-1水平，具有较好地改善内皮细胞结构功能，防治内皮细胞损伤作用。