应用HPLC-ESI-IT-MSn法及TFAfix技术快速鉴定硫酸奈替米星中有关物质的结构

摘要

目的:用HPLC-ESI-IT-MSn法及TFAfix技术，鉴定硫酸奈替米星中有关物质的结构。rn 方法:以水-三氟乙酸-甲醇(84：1：15)为流动相，在agilent SB-C18(4.6mm × 150mm.3.5 μm)色谱柱上对奈替米星及其有关物质进行分离，流速：0.5mL·min-1，柱温：35℃;利用TFAfix技术，即在柱后接一个三通阀，用泵以0.05mL·min-1流速在柱后添加丙酸-异丙醇(20：80)溶液，消除流动相中三氟乙酸对电喷雾离子化的抑制作用;质谱进样采用柱后分流模式(分流比为3：2)，用HPLC-ESI-IT-MSn对奈替米星样品中各组分进行检测，质谱条件：ESI离子源，离子源温度350℃，雾化室压力40 psi，干燥气流速9L/min，正离子检测;通过比较有关物质与标准品的色谱保留时间、准分子离子质荷比和二级质谱的方法，对有标准品的有关物质进行鉴定;其余未知有关物质，主要是通过比较它们与奈替米星或西索米星HPLC-ESI-IT-MSn特征裂解规律，实现结构的快速推定。rn 结果:采用2-4级质谱对硫酸奈替米星中检出的9个有关物质的结构进行了推定，其中7个有关物质结构明确：分别为西索米星(奈替米星的合成原料);去甲基西索米星(合成原料中带入的杂质)，I-N-乙基-加洛糖胺(主要降解产物);5-氪-乙基-奈替米星、2'-氮-乙基-奈替米星、3"-氮-乙基-奈替米星(合成工艺未控制好产生的副产物);3-氮-丙基-依替米星(原料中杂质参与合成过程形成的副产物);另两有关物质的结构轮廓也基本明确，但部分基团在结构中的具体位置无法通过质谱数据指定。rn 结论:建立的方法可以用于硫酸奈替米星中有关物质结构的快速鉴定，为奈替米星质量控制和工艺优化研究提供了可靠快速的分析手段。