禾本科植物LEA3基因克隆-q结构特征的研究

摘要

LEA3基因是与高等植物抵御干旱胁迫密切相关的一类基因。根据GenBank中已登录的禾本科12个LEA3同源基因保守区设计一对简并引物，并比较了不同浓度的6种添加剂对反应结果的影响，确定8％DMSO为最优的反应体系。建立了禾本科LEA3基因快速克隆技术体系，进而利用该技术体系从高粱、茭草、竹子、甘蔗、狗牙根、药用野生稻、疣粒野生稻中成功地克隆了LEA3基因的部分片段，因此，我们推测该引物可能在禾本科LEA3基因中通用。用DNAMAN比较克隆的LEA3基因片段与大麦、小麦、水稻、玉米的同源性，其中玉米和高粱同源性高达83.9％；而玉米和狗牙根的一致性仅为44.9％。根据已克隆的片段设计特异引物，采用RACE的方法分别获得高粱1032bp和茭草1025bp的全长cDNA，并建立了高粱、茭草、大麦、小麦、水稻、玉米的系统发育树，结果表明大麦和小麦的亲缘关系较近，它们和水稻同属-个类群；高粱和玉米较近；茭草形成单独-个分枝。