PRRSV缺失变异毒株JL/07/SW M基因克隆、序列分析与原核表达

摘要

根据PRRSV VR-2332毒株核苷酸序列,设计针对M基因的特异引物,以PRRSVJL/07/SW毒株细胞培养物为模板,利用RT-PCR方法,成功扩增出M基因,将该基因与原核表达载体pGEX-4T-1连接,转化大肠杆菌BL-21,经IPTG诱导表达。测序结果表明：M基因全长525bp,编码174个氨基酸,经同源性比较及进化树分析该毒株属于美洲型。表达产物经SDS-PAGE及Western blot结果证实;PRRSVJL/07/SW毒株GP5基因成功地进行了原核表达,分子量约为43 kDa,表达的目的蛋白占菌体总蛋白含量的19.8%。