PRRSV分离株GP5的基因序列分析及msyB-GP5融合表达质粒的构建

摘要

根据CrenBank中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的基因序列,设计1对包含完整ORF5基因序列的特异引物,利用RT-PCR技术扩增PRRSV GD-11分离株的ORF5基因,并对其进行序列测定,同时与已发表的13株PRRSV进行同源性比较。将扩增的PRRSV GD-11分离株的ORF5基因克隆到含msyB伴侣基因的可溶表达载pBCX上构建重组表达质粒。结果显示,扩增获得的DNA片段约为603bp,与国内经典的CH-la株核苷酸同源性最高,为98.7%,氨基酸同源性为97.55。msyB-GP5重组表达质粒经双酶切后分为两个片段,大小与预期一致,表明已成功获得重组表达质粒。该基因的序列分析与重组表达质粒的成功构建,为对GP5蛋白的研究奠定基础。