公猪精液DNA提取与检测方法的优化设计

摘要

笔者对猪精液基因组D姒的提取方法进行了初步研究，旨在建立一种最优化的提取高质量的猪精液基因组DNA的方法，为做好猪分子育种和分子生物学科学研究提供必要的技术支持。经过对比实验，我们最终确定了最优处理，分述如下：使用自然分层后精液下层的精子沉淀代替原始精液来提取DNA能够取得更好的效果；在本研究采用的1.5ml提取体系中加入50～100ul的精子沉淀，利用PK终浓度至200ug／ml消化6～12h，随后采用氯仿抽提1次，其余步骤按文中通用步骤所述，就可以获得高质量的基因组DNA。同时本研究也确定了低浓度琼脂糖凝胶电泳定性检测DNA质量的最佳条件：琼脂糖凝胶浓度为0.8%,电压为80V／20cM，DNA上样量为2ug，电泳至少30min。