猪脑心肌炎病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒二重RT-PCR检测方法的建立

摘要

根据猪脑心肌炎病毒(EMCV)3D基因和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N蛋白基因序列设计合成了两对特异性引物，经过PCR反应条件的优化，建立了EMCV和PRRSV二重RT-PCR方法，其PCR产物大小分别为286 bp和390 bp，并具有EMCV和PRRSV特征序列。该方法对EMCV和PRRSV的最低检测量分别为10×TCID50和1×TCID50;而对乙型脑炎病毒、猪瘟病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒的PCR检测结果均为阴性;20份临床发病仔猪样品检测结果为PRRSV阳性者15份，EMCV阳性者3份，证明我国存在EMCV感染。该方法敏感、特异，可用于EMCV和PRRSV感染的检测。