固相萃取-HPLC法测定兔血浆中山奈素的浓度

摘要

建立了兔血浆中山奈素浓度的固相萃取-HPLC测定方法。血浆样品经β-葡萄糖醛酸酶和硫酸酯酶酶解后，采用Agilent ODS(C18)SPE小柱处理后测定。以Agilent SB-C18柱(250mm×4.6mm，5μm)为分析柱，流动相为甲醇-0.4 ％磷酸水溶液(55∶45)，流速1.0mL·min-1，检测波长360nm。上述结果表明，血浆样品的最佳酶解条件为β-葡萄糖醛酸酶和硫酸酯酶的终浓度分别为400 U·mL-1、20 U·mL-1，酶解时间为2 h；血浆山奈素浓度的线性范围为0.019～0.608μg·mL-1；方法回收率为80.23％～84.27％；日内和日间精密度RSD均小于10.17％。本方法可以准确、灵敏地测定兔血浆中山奈素的浓度，适用于山奈素血药浓度检测和药代动力学研究。