猪圆环病毒2型全序列分析及感染性克隆的构建

摘要

根据GenBank上已发表的PCV-2序列设计一对PCR引物，从断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)疑似病料中扩增出PCV-2的全序列，并将其克隆入pMD18-T载体，构建pMD18-T-PCV2重组质粒．对此重组质粒进行序列测定分析，结果表明，该PCV-2全序列与国内外不同地区21株参考毒株的全基因核苷酸同源性为93.9%～99.7%。将重组质粒pMD18-T-pcv2用Sac Ⅱ进行酶切，回收PCV-2全序列，并克隆进真核表达载体pBluescriptSK(-)(pSK)的Sac Ⅱ位点，经酶切、PCR及测序鉴定后证明获得阳性重组质粒pSK-PCV2．