重组鸡痘病毒外源基因表达的实时荧光定量PCR检测方法建立

摘要

本研究采用DNA嵌入荧光染料SYBR GreenⅠ，针对共表达鸡新城疫和鸡传染性法氏囊炎病毒基因的重组鸡痘病毒rFPV-FHN, rFPV-FVPO，根据外源基因序列设计并合成特异性real-time PCR引物，通过real-time PCR的方法检测鸡痘重组病毒rFPV-FHN,rFPV-FVPO外源基因的拷贝数，分析不同代次重组鸡痘病毒的外源基因在鸡胚成纤维细胞中的转录水平和表达情况，从而准确得出外源基因在宿主细胞中的整合情况，为阐明重组鸡痘病毒的免疫机理与进一步的临床应用研究提供试验数据。