抗J亚群禽白血病gp85蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

摘要

J亚型禽白血病(sub-group J avian leukoaie)是由J亚型禽白血病病毒(A-vian leukosis virus subgroup J,ALV-J)引起的一类以生长抑制、免疫抑制、髓细胞癌变为特点的禽类传染性肿瘤性疾病。由于它通常只侵袭骨髓单核细胞，而很少侵袭淋巴性白细胞，因而这种亚型主要引起禽骨髓性白血病。现阶段，对ALV-J感染没有有效的治疗方法，也没有有效的疫苗可供使用。通过检测淘汰阳性鸡是净化该病的主要措施。因此研制ALV-J的特异性快速诊断方法具有重要的实际意义。国内诊断ALV-J的主要手段是检测ALV-J的抗体，国外已经有商品化的试剂盒，但价格昂贵，导致国内净化ALV-J的成本提高。因此，本研究旨在利用国内分离株自主研制ALV-J抗原的检测方法，以降低净化成本，采用分段亚克隆ALV-JS 1株gp85基因，构建重组原核表达质粒pGEX-6p-1-gp85-A, pGEX-6p-1-gp85-B，并使之在大肠杆菌中成功表达，得到了gp85蛋白肤段，分别与gp85单克隆抗体反应，通过West-em blot鉴定分析ALV-J-gp85单抗特异性反应的肽段。