EFS40冷冻管法对小鼠胚胎冷冻效果的探索

摘要

目的：采用EFS40冷冻液,对小鼠不同发育期的胚胎进行冷冻管法冷冻和解冻。探讨冷冻平衡时间、胚胎发育时期对冷冻效果的影响。方法：体内冲取的2-细胞期胚胎在KSOM培养液微滴内分别培养到4-细胞和8-细胞期胚胎：将各期胚胎和5μL0.5M蔗糖溶液共同装入在0℃下充分预冷的冷冻管中,处理不同时间后加入100μL的EFS40冷冻液,迅速投入液氮；解冻后观察其存活率以及培养至囊胚的囊胚率。结果：蔗糖平衡时间和胚胎的发育时期对冷冻后胚胎存活率具有极显著的影响,但蔗糖平衡时间对胚胎冷冻效果的影响更显著。结论：小鼠不同时期胚胎经蔗糖平衡2min冷冻后存活率较高,且囊胚率最高,因此小鼠胚胎冷冻时蔗糖平衡2min冷冻效果好。