N-乙酰半胱氨酸对肺微血管内皮细胞NF-κB活性影响的体外研究

摘要

目的：阐明N-乙酰半胱氨酸(NAC)对肺微血管内皮细胞NF-κB结合活性和COX-2表达的影响机制。方法：体外培养微血管内皮细胞株，MTT检测NAC对肺微血管内皮细胞增殖的抑制作用。分别予NAC(10-3M)和TNFα 100ng/mL处理1小时，EMSA检测NF-κB的结合活性。Westernblot检测相应的胞浆内I-κB α的表达。ICC观察肺微血管内皮细胞NF-KB表达的核转移。LSCM检测NAC对微血管内皮细胞中COX-2表达的影响。结果：NAC对肺微血管内皮细胞具有明显的抑制作用。TNFα可诱导NF-κB结合活性，而NAC可显著抑制NF-κ B结合活性。TNFα处理后I-κK Bα表达减弱，NAC处理后I-κ B α表达增强。TNFα刺激1小时后，NF-KB表达从细胞浆转移至细胞核内。NAC预处理后再予TNFα刺激，NF-KB表达主要位于细胞浆，很少发生核转移。肺微血管内皮细胞经TNFα处理后细胞内COX-2表达明显高于NAC和TNFα联合处理组以及正常对照组(P<0.05)；NAC和TNFα联合处理组与正常对照组无明显差异(P>0.05)。结论：NAC可抑制肺微血管内皮细胞的增殖；NAC可抑制肺微血管内皮细胞NF-κB结合活性和COX-2的表达。