霍乱疫苗中残余霍乱毒素检测方法的建立及验证

摘要

目的：建立检测霍乱疫苗中残余霍乱毒素的方法。方法：采用间接酶联免疫法，即用神经节苷脂包被，加入待检样品，再加入兔抗霍乱毒素B 亚单位抗体，用标准样品的吸光度值(OD值)对标准样品的浓度绘制4-参数拟合曲线，根据标准曲线计算出待测样品中的CT 浓度。结果：在浓度范围0.6－16ng/ml 之间,CT 标准浓度和检测浓度成线性关系,R2=0.9986。精确度：在浓度范围0.6－16ng/ml,CT 的平均回收率在96.24％-114.44％之间。精密度：批内变异CV％≤12.98％，批间变异CV%≤18.48%。特异性：在CT 浓度为10ng/ml 时，平均回收率为102.6％；CT 浓度为5ng/ml 时，平均回收率为111.17％；CT 浓度为2.5ng/ml时，平均回收率为123.83％。结论：该方法可检测霍乱原液中CT 含量。