乙脑病毒RT—PCR检测方法的建立及应用

摘要

目的:建立乙脑病毒RT—PCR检测方法.rn 方法:参照已发表的乙脑病毒全基因组序列,针对其衣壳蛋白C基因设计1对引物,提取乙脑病毒的RNA,逆转录为cDNA,进行PCR扩增,对检测方法进行优化,验证该方法的特异性及敏感性,并对90份临床样本进行检测.rn 结果:所建立的乙脑病毒RT—PCR检测方法特异性和敏感性良好,以含乙脑病毒衣壳蛋白C基因的重组质粒DNA为模板,最低可检出10 pg DNA.90份样本经RT—PCR检测,有23份扩增出特异性的目的条带.从小型猪脑组织中能分离鉴定出乙脑病毒.rn 结论:已建立了乙脑病毒逆转录PCR检测方法,为乙脑病毒检测、流行病学调查奠定了基础.