辣椒ISSR反应体系的建立与优化

摘要

ISSR是一种由单一引物并以重复序列为主要引物序列的PCR标记。许多PCR条件，例如，模板DNA、TaqDNA聚合酶、Mg2+、dNTPs及引物等因素都会对ISSR的结果产生影响。本实验利用宇椒一号为材料研究辣椒ISSR的最优体系，最终确定在20μL体系中各反应物的最适含量为：40 ng模板DNA,0.2 mmol/L dNTP,0.5μmol/L ISSR引物，IUTaq DNA聚合酶,2μL 10×PCR Buffer,2.5 mmol/L MgCl2。该体系的建立为今后利用ISSR技术进行辣椒种质资源的遗传多样性分析奠定了技术基础。