部分去糖基化策略特异性鉴定N糖基化位点方法的建立

摘要

蛋白质糖基化参与了几乎所有重要的生命活动，并与很多疾病的发生有直接关系，所以糖基化蛋白的研究越来越受到关注。要研究糖蛋白首先要确定糖基化位点。本实验选取标准蛋白作为研究对象，找到可靠的二级碎片离子特征峰，可以准确确定糖基化肽段，该方法今后将应用于规模化的糖肽鉴定及修饰位点确认分析。通过实验证明了利用多酶酶切去掉糖链策略在分析N糖基化位点具有明显优势，首先，母离子203.079 Da作为可变修饰，可以避免0.984 Da带来的假阳性的结果;其次，利用特征离子作为标志来挑选糖肽图谱，大大提高糖肽图谱鉴定数量。