ANXA2在肝癌增殖中的作用及不同治法方药的调节

摘要

目的：观察不同中医治法方药对大鼠肝癌ANXA2 表达的调控差异，以及ANXA2 在人肝癌细胞增殖中的作用。方法 1）采用DEN 诱发大鼠肝癌，分别经中药健脾益气、清热解毒、活血化瘀等治疗后，检测肝癌组织ANXA2 表达的差异;2）针对人ANXA2 基因mRNA 序列设计2个siRNA 靶点，分别经质粒重组后通过脂质体转染SMMC-7721 人肝癌细胞株，检测转染前后该基因的表达差异及细胞生长增殖情况。结果：1）芯片结果显示，肝癌形成后， Anxa2 表达量达到造模前近10 倍。活血和健脾益气治法对其具有一定的下调作用;2）成功筛选到ANXA2 基因RNA 干扰的一个有效靶序列，经实时荧光定量PCR 检测到转染72h 后该基因的表达水平明显降低;3）MTT 的结果显示，有效干扰靶点转染144h 后细胞的生长增殖得到了明显的抑制;4）FCM 结果显示，该基因RNA 干扰后引起细胞阻滞于G1 期。讨论：成功应用DEN 诱发大鼠肝癌形成，ANXA2 基因在肝癌形成的后期表达明显升高，经进一步生物学功能研究证实，该基因的高表达与肿瘤细胞的恶性增殖有关。