马兜铃酸促进肾小管上皮细胞转分化的发生及温阳活血方干预作用研究

摘要

目的：探讨马兜铃酸(AA)在大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK-52E)转分化中的可能作用，及温阳活血方拮抗转分化机理。方法：(1)MTT法检测不同浓度温阳活血方含药血清对NRK-52E细胞增殖的影响。(2)免疫细胞化学法检测不同浓度AA(0、5、10、20、40 μg·ml-1)对NRK-52E细胞表达α-平滑肌肌动蛋白的影响。(3)ELISA法检测AA刺激下COL-I的表达及温阳活血方对其调控作用。(4)Real-TimePCR法检测温阳活血方对TGFβ1mRNA、ET-1 mRNA、VEGF mRNA等肾问质纤维化相关因子的调控作用。结果：(1)AA5 μg·ml-1、AA10 μg·ml-1、AA20 μg·ml-1、AA40 μg·ml-1均可刺激NRK-52E表达α-平滑肌肌动蛋白，AA10 μg·ml-1浓度下α-平滑肌肌动蛋白表达较强。(2)AA刺激NRK-52E细胞12、24、48h后，COL-I的表达水平随着时间的延长而增强。(3)马兜铃酸刺激NRK-52E细胞24h后，TGF-β1 mRNA表达上调(p<0.05)，VEGF m RNA表达显著下调(P<0.01)，ET-1mRNA的表达显著上调(P<0.01)，COL-I表达水平显著高于正常对照组(P<0.01)，温阳活血方干预下，TGF-β1 mRNA表达下调(p<0.05)，VEGFm RNA表达显著上调(P<0.01)，ET-1 mRNA有下调趋势，COL-I表达水平显著下调。结论：(1)马兜铃酸可促进肾小管上皮细胞转分化的发生(2)温阳活血方具有拮抗肾小管上皮细胞转分化作用。