通过siRNA文库筛选发现与人胃癌细胞生长有重大关系的基因

摘要

胃癌作为一种较常见的恶性肿瘤,严重危害人类健康.相较传统的手术治疗及放化疗,基因治疗可能产生更好的治疗效果.实际上,也已经有一些胃癌相关基因被报道.而本研究的目的在于找寻其他对胃癌治疗有意义的基因.由于蛋白激酶在细胞生物学活性中有重要意义,故选择了一些蛋白激酶的基因作为靶基因进行研究.利用RNA干扰技术,通过siRNA文库的筛选,检测这些蛋白激酶基因在表达沉默后,对人胃癌细胞活性的影响.此siRNA文库包含500个蛋白激酶基因相对应的siRNA,以20nM 的量经阳离子脂质体转染试剂LipofectamineTM2000转染后,通过CellTiter GIoTM萤光活细胞活性检测系统,高效灵敏,快捷方便地测定细胞活性.通过siRNA文库的筛选,发现了一些蛋白激酶的基因在被抑制之后,人胃癌细胞HGC-27的活性明显降低.经分析后,发现PLK1是这500个基因中最有可能对人胃癌细胞HGC-27造成重大影响的基因,也可能将是新的基因治疗或药物治疗的靶点.