益生菌对结肠炎小鼠空肠上皮PepT1介导的氨基酸吸收功能影响的实验研究

摘要

目的:尽管已有研究表明益生菌能有效预防和治疗结肠炎症，而有关益生菌对肠道营 养素的吸收，尤其是PepT1介导的饮食蛋白的吸收研究报道较少。本实验研究益生菌对结肠 炎小鼠空肠黏膜上皮PepT1介导的氨基酸吸收功能的影响及其调控机制。方法:以白介素10 基因敲除（IL-10-/-）小鼠为结肠炎模型，益生菌采用植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum, LP）实验分成四组，即对照组（WT）、WT+LP、IL-10-/-、IL-10-/-+LP，LP灌胃干预四周后， 通过建立空肠原位单通道灌流小鼠模型，以头孢氨苄为PepT1特异性底物，利用HPLC方法对 血浆氨基酸和头孢氨苄含量进行检测，以此反映PepT1转运活性；Western blot、免疫荧光 和RT-PCR技术对PepT1表达和分布进行分析，并利用活性分析试剂盒和Western blot技术对 蛋白激酶C（protein kinase C, PKC）活性及其磷酸化水平进行检测。结果:与IL-10-/-小鼠 相比，LP干预能有效阻止IL-10-/-+LP小鼠血浆总的氨基酸含量和头孢氨苄含量降低，而 Western blot和RT-PCR分析发现PepT1蛋白和mRNA在各组小鼠空肠黏膜上皮的表达并无统计 学差异。此外，研究发现IL-10-/-小鼠空肠黏膜上皮存在PKC活性及其磷酸化水平下调，LP 干预治疗能有效阻止以上改变。 结论:LP能通过上调PepT1转运活性增加血浆氨基酸含量， 这与LP能增强PKC活性及其磷酸化水平有关，而与PepT1表达和分布异常无关。