从OPG/RANKL/RANK系统阐述补骨脂-蛇床子抑制乳腺癌骨转移的机制

摘要

目的：从OPG/RANKL/RANK系统探讨不同比例温肾药对补骨脂-蛇床子抑制乳腺癌骨转移的机制，发掘温肾药对补骨脂-蛇床子抑制乳腺癌骨转移最佳配伍比例。方法：MDA-MB-231BO注射裸鼠左心室造乳腺癌骨转移模型，随机分为补骨脂：蛇床子4：0组、3：1组、1：1组、1：3组、0：4组、唑来磷酸组、生理盐水组，实验组在造模后1周给予中药煎剂灌胃干预，阳性对照组造模后1周腹腔注射唑来磷酸，阴性对照组造模后1周腹腔注射生理盐水。用药6周后，通过放射性核素骨显像和X-ray摄片找到转移病灶，然后取病变组织进行RT-PCR&Western-blot检测护骨素(osteoprotegerin,OPG)/核因子kB的受体激活剂配体(receptor activator of NF-κB ligand，RANKL)/白介素8(interleukin-8,IL-8)/甲状旁腺激素相关蛋白(parat hyroid hormone-related peptide,PTHrP)/巨噬细胞集落因子(macrophage colony stimulating faetor,MCS-F)的基因及蛋白表达量。结果：蛇床子、补骨脂及补骨脂-蛇床子不同配伍比例均对抑制骨转移基因有一定的作用，OPG的表达量增高(蛇床子：补骨脂1：1mRNA的表达量182.114±0.50)，IL8、PTHrP、M-CSF、RANKL的表达量均下降(蛇床子：补骨脂1：1组IL8、PTHrP、M-CSF、RANKL，mRNA的表达量分别是28.36±1.25，21.33±0.95，8.47±1.08，15.08±1.49)。中药蛇床子-补骨脂1：1组对相关抑制骨转移基因的mRNA表达量作用效果最为明显，与生理盐水组比较有显著性差异(P<0.01)。同时，蛇床子、补骨脂及蛇床子-补骨脂不同配伍比例均能够上调骨转移灶中OPG、下调RANKL/IL-8/PTHrP/MCS-F的蛋白表达。其中，补骨脂：蛇床子1：1组的效果最为明显，与生理盐水组比较有显著性差异。结论：温肾药对补骨脂-蛇床子通过激活OPG/RANKL/RANK通路，抑制乳腺癌骨转移，其中1：1组效果最为明显，为最佳配伍比例。