苏州市耐利福平结核分枝杆菌rpoB基因突变特点的研究

摘要

目的：了解苏州市地区耐利福平(Rifampin，RFP)结核分枝杆菌rpoB基因突变特点，以期为本地区RFP耐药结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis，MTB)的临床快速诊断提供有价值的分子标记靶点。rn 方法：通过裂解MTB抽提基因组DNA，采用PCR扩增和DNA测序方法，分析苏州市结核病患者痰培养阳性并经药敏试验诊断为RFP耐药M7B的rpoB基因RFP耐药决定区(Rifampin resistance-determiningregion，RRDR)和CII区变异谱与变异率。将主要突变形式RROR-531(TCG-TTG)与传统药敏实验进行诊断学试验，评价此类型突变作为RFP耐药菌株分子标记靶点的临床应用价值。rn 结果：42例RFP耐药M7B的rpoB基因总突变率为90.5％(38/42)，其中RRDR-516、RRDR-526、RRDR-531、RRDR-533和CII region-572突变率分别为7.1％(3/42)，19.0％(8/42)，64.3％(27/42)、2.4％(1/42)和2.4％(1/42)，RRDR-533和CII region-572均以联合突变形式出现。在所检测到的突变中，以RRDR-531(TCG-TTG)为主要形式(61.9％)。以此类型的位点突变作为RFP耐药菌株诊断的分子标记，与传统药敏试验比较进行c2检验，结果表明，与敏感菌株相比，RRDR-531(TCG-TTG)突变在RFP耐药菌株中呈显著差异(c2=25.3，P＜0.01)，灵敏度为61.9％，特异度为100％，阳性预测值为100％，阴性预测值为60.98％，95％可信区间的比值比为81.91，似然比2.26。rn 结论：rpoB基因RRDR-531(TCG-TTG)突变是苏州市地区MTB产生RFP耐药性的主要分子机制，其作为RFP耐药MTB诊断的分子标记靶点具有较好的临床应用价值。