E钙黏蛋白翻译后岩藻糖修饰调节肺癌细胞EMT

摘要

E-钙黏蛋白是一种上皮细胞标志蛋白,在上皮细胞的链接作用非常重要,在上皮细胞向间质细胞转化过程的过程中其表达水平改变显著,但是翻译后修饰对于E-钙黏蛋白的调节是否也会影响到上皮细胞向间质细胞转化并不明确.翻译后修饰是一种很重要的调节方式,为了探索核心岩藻糖修饰的E钙黏蛋白的功能改变,以及所引发的细胞信号传导,用一对分别具有低、高转移潜能的肺癌细胞95C和95D转染FuT8基因,建立起一对核心岩藻糖基转移酶高低表达的细胞模型.结果表明，在95C中过表达核心岩藻糖基转移酶能使E钙黏蛋白核心岩藻糖基化，抑制该细胞的迁移能力，而在95D中，干扰了核心岩藻糖基转移酶使E钙黏蛋白核心岩藻糖基化水平低下，但能促进细胞迁移，同时，β连环蛋白654位酪氨酸以及SRC激酶416位酪氨酸磷酸化水平加强，在E钙黏蛋白免疫沉淀复合物中磷酸化的SRC激酶结合也增多，而β连环蛋白的结合增加，同时细胞中AKT第315、326位酪氨酸以及GSK-3β第9位丝氨酸磷酸化水平增多，但β连环蛋白第37位丝氨酸磷酸化水平降低，在过表达核心岩藻糖基转移酶的95C细胞中则相反。N-钙黏蛋白和Snail1蛋白水平在干扰核心岩藻糖基转移酶的95D细胞中升高，在过表达核心岩藻糖基转移酶的95C细胞中降低。SRC激酶抑制剂PP2和SU6656的作用后，由核心岩藻糖基转移酶所引起的上述调节作用受到抑制。另外，E-钙黏蛋白的核心岩藻糖基修饰也能影响半乳糖凝集素-3和GSK-3β的相互作用。我们的结果表明E-钙黏蛋白的核心岩藻糖基修饰能够通过调节β连环蛋白以及SRC/Akt/GSK-3β信号通路来调节细胞迁移。