抗短裸甲藻毒素单克隆抗体的制备

摘要

短裸甲藻毒素为小分子海洋毒素,主要引起神经症状,因此又称为神经性贝类毒素.BTX具有胚胎毒性、发育毒性、免疫毒性、遗传毒性和致癌作用等毒性效应,一般的高温加热的方法较难破坏其毒性.短裸甲藻引起的短裸甲藻赤潮危害严重,短裸甲藻产生的毒素可导致鱼类以及其他生物中毒甚至死亡,并通过食物链逐级传递和积累,最终传递给人类。并且短裸甲藻分布极为广泛，主要分布在墨西哥湾，尤其是佛罗里达西南沿海地区，以及美国的大西洋东南沿岸，在我国东南沿海地区广泛分布。短裸甲藻毒素对水产养殖业的影响较大，经常造成非常严重的经济损失，对食品安全和人民的生命健康构成了一定的威胁，引起了广泛的关注。ELISA方法相对于其它方法具有灵敏度高、特异性强、快速便捷易于操作、适合现场大规模检测等特点，因此被广泛应用于小分子贝毒素的检测。由于短裸甲藻毒素为小分子物质不具有免疫原性，本研究以短裸甲藻毒素与载体蛋白HSA和OVA分别交联并分别作为免疫原和检测原。将多次免疫的抗血清效价较高的Balb/c小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合制备杂交瘤细胞。通过多次亚克隆筛选得到阳性杂交瘤细胞株。该研究为建立基于免疫学检测BTX方法和开发生产高质量的胶体金试剂盒奠定坚实的基础。