碱解法测定中华鳖肝脏RNA-DNA含量比值方法的改进

摘要

中华鳖是营养丰富的水生动物，在其养殖和资源管理的研究中，生长情况是最重要的研究指标之一．RNA—DNA含量比值作为瞬时生长指标被认为是能够反映生长的可靠指标。为优化碱解法测定中华鳖肝脏组织RNA-DNA含量比值的操作流程,选用中华鳖稚鳖的肝脏组织,在Buekley(1979)和Robbins(1990)方法的基础上,分别针对以往操作流程中匀浆介质、离心速度、碱解水浴时间和碱解量的差别进行实验.结果发现,使用由O.05mol/L Tris-HCl+0.005mol/L EDTA(pH7.4)组成的匀浆介质,12000×g的离心速率,37℃碱解水浴2h以及0.56mL0.3mol/L KOH+0.25mL1.5mol/L PCA的碱解酸化组合能有效提高碱解法测定中华鳖肝脏组织RNA-DNA含量比值的稳定性.