成牙本质细胞

摘要： 细胞极化是前体细胞分化为成牙本质细胞的重要步骤,是细胞发挥生理功能的结构基础,诱导间充质干细胞极化定向分化为成牙本质细胞是实现牙髓-牙本质复合体再生的关键。细胞周期蛋白42(CDC42)是细胞极性化的开关分子,其参与成牙本质细胞和成釉细胞极化的作用机制尚不明确,且相关研究较少。本文回顾了成牙本质细胞的极化以及CDC42在其细胞极化方面的相关研究,为成牙本质细胞分化及牙髓-牙本质再生研究提供基础。

摘要： 根尖牙乳头干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的牙源性间充质干细胞,是牙根部成牙本质细胞的重要来源,在牙根部牙本质的发育中发挥重要作用,其在多种因素作用下能够向成骨和成牙本质方向分化,具有形成牙髓-牙本质复合体的能力。诱导根尖牙乳头干细胞成骨和成牙本质方向分化,尤其是促进根尖孔未闭合的年轻恒牙牙根继续发育,对于患牙保存具有重要意义。本研究从生物活性材料及支架、炎症微环境、物理化学因素和基因转染等方面回顾了影响根尖牙乳头干细胞成骨和成牙本质方向分化的诱导因素,其中细胞外基质材料、硅酸盐类生物活性材料和炎症微环境的相关研究对牙髓-牙本质复合体再生具有更显著的作用优势。

摘要： 目的研究Ⅰ型骨形态发生蛋白(BMP)受体活化素A受体1(ACVR1)调节小鼠成牙本质细胞极性及促进牙本质形成的作用机制。方法通过Cre-loxP系统,以Osterix为启动子激活Cre重组酶,敲除小鼠牙源性间充质细胞的Acvr1基因。于小鼠出生后21 d收集标本,观察成牙本质细胞形态、排列及牙本质的形态;免疫荧光染色检测小鼠极性相关标记物及高尔基体的定位;天狼星红染色评价牙本质的胶原形成。结果Acvr1基因敲除后,矿化牙本质和前期牙本质之间以及前期牙本质和成牙本质细胞层之间的分界线曲折不平,牙尖处有骨样牙本质形成;成牙本质细胞高柱状形态丧失,细胞间紧密连接和顶端极性相关蛋白定位异常,高尔基体与细胞核的相对位置改变,牙本质胶原排列不规则,胶原成熟度降低。结论小鼠牙源性间充质中的ACVR1通过促进成牙本质细胞的极性,进而促进牙本质的形成。

摘要： 目的:通过下调分离缺陷基因3(partitioning defective-3,Par3)的表达探究其对小鼠成牙本质细胞系细胞(odontoblast lineage cells,OLCs)胞间连接的调控作用及相关生物学影响。方法:通过免疫荧光实验分别观察Par3在大鼠牙髓组织及小鼠成牙本质细胞中的表达及分布;利用Western blot检测炎症状态下成牙本质细胞Par3的表达情况;利用小干扰RNA(siRNA)敲低成牙本质细胞Par3的表达后,通过透射电镜观察Par3表达下调前后小鼠成牙本质细胞胞间连接结构的变化;利用Western blot及细胞免疫荧光技术检测Par3表达下调前后细胞紧密连接相关分子ZO-1(zonula occludens-1)的表达及分布情况;最后,通过EdU(5-ethynyl-2’-deoxyuridine)、Transwell及流式细胞术等检测Par3表达下调对成牙本质细胞增殖、迁移及凋亡等生物学功能的影响。结果:Par3在大鼠牙髓组织中与成牙本质细胞分布一致。体外条件下Par3表达于成牙本质细胞胞质内,且在炎症状态下表达水平下降。Par3表达下调后小鼠成牙本质细胞胞间连接不连续,紧密连接相关蛋白ZO-1表达下调且其分布由细胞膜转移至细胞质;Par3表达下调组与对照组相比,细胞增殖、迁移能力增强,凋亡能力受抑制。结论:Par3表达下调可通过影响ZO-1的表达/分布破坏小鼠成牙本质细胞胞间连接,同时通过促进细胞增殖及迁移等能力增强了细胞的修复能力。

摘要： 目的:研究小鼠磨牙发育不同阶段牙胚组织中整合素β1和层黏连蛋白受体1(LAMR1)的表达模式,探讨二者在小鼠磨牙牙胚组织发育过程中可能的作用机制及其意义。方法:取胚胎期第13.5天(E13.5)、E14.5、E16.5、E18.5和出生后5 d(PN5)的小鼠,分别作为E13.5、E14.5、E16.5、E18.5和PN5组,每组5只,分离小鼠头部,固定、脱钙、脱水、包埋和切片,HE染色观察各阶段小鼠牙胚组织形态表现,免疫组织化学染色观察小鼠磨牙发育不同阶段牙胚组织中整合素β1和LAMR1蛋白的表达分布情况和表达水平。结果:HE染色,E13.5组小鼠牙胚组织发育处于蕾状期,上皮细胞突入到外胚间充质中,形成上皮芽,状如花蕾;E14.5组小鼠牙胚组织发育处于帽状期,上皮芽体积增大,称为帽状期成釉器,成釉器周围外胚间充质细胞密度增加,形成牙乳头;E16.5组小鼠牙胚组织发育处于钟状早期,成釉器进一步长大,形似吊钟,初步具有牙尖形态;E18.5组小鼠牙胚组织发育处于钟状晚期,成釉器进一步发育,内釉上皮细胞向前成釉细胞分化,形态由立方状变为高柱状;PN5组小鼠牙冠发育完成,形成颈环、上皮根鞘和上皮隔等结构,成釉细胞和成牙本质细胞分化成熟,呈高柱状整齐排列,已有釉质和牙本质形成。免疫组织化学染色,整合素β1和LAMR1蛋白在小鼠磨牙发育不同阶段牙胚组织中的上皮和牙乳头均有表达,且在各部位的表达强度随细胞分化的进程整体呈逐渐增强的趋势。PN5组小鼠牙胚组织成釉细胞中整合素β1蛋白表达水平高于E14.5、E16.5和E18.5组小鼠牙胚组织内釉上皮细胞/前成釉细胞(P<0.05);PN5组小鼠牙胚组织成牙本质细胞中整合素β1蛋白表达水平高于E14.5、E16.5和E18.5组小鼠牙胚组织前成牙本质细胞(P<0.05);E16.5和E18.5组小鼠牙胚组织内釉上皮细胞/前成釉细胞中LAMR1蛋白表达水平高于E14.5组小鼠牙胚组织内釉上皮细胞(P<0.05),且低于PN5组小鼠牙胚组织的成釉细胞(P<0.05);E18.5组小鼠牙胚组织前成牙本质细胞中LAMR1蛋白表达水平高于E16.5组小鼠牙胚组织前成牙本质细胞(P<0.05),且低于PN5组小鼠牙胚组织成牙本质细胞(P<0.05)。PN5组小鼠牙胚组织牙尖处较为成熟的成牙本质细胞中整合素β1和LAMR1蛋白表达水平高于牙尖之间和牙颈部尚未完全成熟的成牙本质细胞(P<0.05)。结论:整合素β1和LAMR1表达于小鼠磨牙发育不同阶段牙胚组织的基底膜、(前)成釉细胞和(前)成牙本质细胞中,二者可能参与细胞外基质信号的转导,并在成釉细胞和成牙本质细胞的分化和极性形成过程中起促进作用。

摘要： 目的:研究组蛋白去乙酰化酶(HDAC5)对成牙本质细胞增殖及成牙/成骨分化的影响。方法:收集临床因治疗拔除的健康和牙髓炎状态的第三磨牙进行免疫荧光染色观察HDAC5在牙髓中的表达情况,慢病毒载体转染成牙本质细胞系(OLCs),建立过表达HDAC5的OLCs,CCK8实验检测细胞增殖,碱性磷酸酶(ALP)染色及活性检测、茜素红染色观察矿化能力,Western blot检测I型胶原(COL1α)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)、Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙蛋白(OCN)、骨涎蛋白(BSP)、牙本质基质蛋白1(DMP-1)的蛋白表达。结果:与健康牙髓组织相比,炎症牙髓成牙本质细胞层见高表达的HDAC5,过表达HDAC5后OLCs增殖活力抑制,ALP活性降低,矿化结节形成减少,成牙/成骨相关蛋白表达均降低(P<0.05)。结论:HDAC5在牙髓炎成牙本质细胞层高表达且抑制OLCs的增殖和成牙/成骨向分化。

摘要： 目的:探讨转录因子剪接型X-盒结合蛋白1(spliced X-box binding protein 1,XBP1s)对炎症诱导的成牙本质细胞自噬的作用。方法:免疫组化检测XBP1和自噬指标LC3在健康和炎症牙髓组织中的表达。利用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激小鼠牙乳头细胞系(mDPC6T)建立体外炎症模型,检测XBP1和自噬指标LC3、ATG5的表达,再分别利用抑制剂KIRA6,和活性氧(Reactive oxygen species,ROS)清除剂NAC处理细胞。通过免疫荧光和蛋白免疫印迹法检测XBP1s、LC3和ATG5等指标的表达。结果:XBP1s和LC3在炎症牙髓的成牙本质细胞层中表达升高。LPS可诱导XBP1s在mDPC6T细胞中表达,与LC3、ATG5等自噬指标的表达趋势相似。抑制XBP1s可降低LC3、ATG5等自噬指标的表达。结论:XBP1s可调控炎症诱导的成牙本质细胞自噬。

摘要： 目的 探讨pH微环境对成牙本质细胞增殖活性的影响.方法 以永生化成牙本质细胞系小鼠牙乳头细胞-23(murine dental papilla cells-23,MDPC-23)为研究对象,利用盐酸、氢氧化钠溶液调节培养基pH,模拟酸、碱及生理环境的不同pH,并检测不同pH培养基中MDPC-23细胞的增殖活性,以分析pH微环境对其生长、增殖行为的影响.结果 成牙本质细胞MDPC-23在不同pH的微环境下呈现出不同的形态特征,其细胞形态随着培养基pH值的增高呈现短梭形、聚集生长的趋势;其增殖活性在酸性环境下得到抑制,并随着pH的增大而逐渐增加.结论 龋坏部位由于细菌产酸代谢产生的低pH微环境可引起成牙本质细胞生理活动改变,pH微环境能够调控成牙本质细胞形态和增殖活性.

摘要： 牙根发育是一个复杂的过程,由上皮和间充质共同调控完成,并涉及多种分子的相互作用。研究发现,核转录因子I-C(nuclear factor I-C,NFIC)是调控牙根发育的主要分子之一,NFIC参与根部牙本质的形成。牙根的生长是通过与多种分子相互作用实现的,这些分子包括转化生长因子-β(transforming growth factorβ,TGF-β)、Krüppel样转录因子4(Krüppel-like factor 4,KLF4)、Osterix(OSX)、Hedgehog(HH)、AFF4和微量元素锌等。本文将对NFIC在牙根形成过程中的作用和与NFIC相关的分子作一综述。

摘要： 牙本质对维持牙正常的结构和生理功能具有重要意义，探讨牙源性间充质细胞命运决定和成牙本质细胞定向分化的机制，是认识牙发育和实现牙再生的关键。我们的研究表明，同源盒基因 Lhx8（LIM homeobox 8）是调控牙发育和成牙本质细胞增殖分化平衡的关键分子。Lhx8 促进成牙本质细胞定向相关基因表达，使未分化的牙源性间充质细胞定向分化为前成牙本质细胞；另一方面又抑制成牙本质细胞终末分化相关基因的表达，防止细胞过早进入终末分化和增殖停滞，因而维系着牙发育过程中成牙本质细胞增殖分化的平衡。对 Lhx8靶基因启动子区表观修饰进一步分析，发现过表达 Lhx8 可以促进成牙本质细胞终末分化相关基因启动子区 H3K9 发生三甲基化（me3），导致上述基因表达抑制或沉默。我们的研究结果还显示，Lhx8 能够与催化 H3K9me3 的关键酶 Suv39h1 相互作用，且 Suv39h1 在牙源性间充质和成牙本质细胞中的表达谱与 Lhx8 相关，干涉 Suv39h1 则将显著阻断 Lhx8对成牙本质细胞生物学功能和下游靶基因的调控，提示在牙发育过程中，Lhx8 协同Suv39h1 通过表观遗传调控牙源性间充质细胞和成牙本质细胞的增殖分化平衡。

摘要： 本文通过检测极性蛋白PAR3在出生后2天小鼠下颌磨牙的成牙本质细胞中的表达,初步探讨其在成牙本质细胞分化晚期对极性的作用.

摘要： 细胞分化是一种细胞命运决定的过程.成牙本质细胞作为一种独特的终末分化细胞,其调控的分子机制至今未阐明.本团队首先利用基因芯片技术筛选了成牙本质细胞分化中差异表达的基因,观察了Klf4时空表达模式,发现Klf4高度特异性地表达于极化期成牙本质细胞;构建Wnt1-Cre; Klf4f/f条件性敲除小鼠在成牙本质细胞中特异性失活Klf4后,发现条件敲除小鼠的成牙本质细胞分化延迟,牙本质形成障碍.为进一步探索Klf4的表观调控因子，利用芯片技术分析了成牙本质细胞分化阶段的MicroRNA表达谱和基因甲基化状态.其中miR-145的表达水平随着成牙本质细胞分化而逐渐下调，过表达miR-145可抑制成牙本质细胞分化特异基因的表达，miR-145可通过与Klf4mRNA的3'UTR区域结合，抑制Klf4的表达水平。在Klf4启动子中存在一个CpG岛去甲基化.DLA实验证明Sp1可通过此结合位点调控KIf4基因的转录。本研究揭示了在成牙本质细胞分化过程中存在着以转录因子Klf4为核心，microRNA和甲基化等表观遗传因子共同参与的调控网络。

摘要： 牙发育或者牙本质的形成依赖于上皮和间充质之间的信号交流,并且受到严格的分子调控.研究表明,FAM20C既表达于成釉细胞,也表达于成牙本质细胞.特异性敲除上皮FAM20C,其釉质的形成受到影响,出现釉质缺陷,但是骨和牙本质的形成未见异常;特异性敲除神经嵴来源间充质FAM20C,出现显著的牙本质和牙槽骨缺损,而釉质形成未见异常.牙齿发育经过蕾状期进入帽状期,牙本质细胞分化进入起始阶段,干扰牙间充质FAM20C的表达对成牙本质细胞进一步分化、牙本质发育和牙本质基质形成的影响尚不明确.

摘要： 本发明公开了一种诊断牙本质生成不全II型和/或牙本质生成不全II型伴耳聋的方法，它包括检测个体的DSPP基因、转录本和/或蛋白与正常相比是否存在变异，存在变异就表明该个体患牙本质生成不全II型和/或牙本质生成不全II型伴耳聋的可能性大于正常人群。本发明还公开了治疗牙本质生成不全II型和/或牙本质生成不全II型伴耳聋的方法和药物组合物。

摘要： 本发明涉及口腔医学领域，具体而言，涉及一种基于牙髓牙本质复合体的再生构建方法及构建牙髓牙本质复合体结构的生物支架材料。该方法，首先制备牙髓组织细胞外基质材料；其次将牙髓组织细胞外基质注射材料与干细胞混合，得到混合材料；最后将这种混合材料与蛋白因子复合。从而获得牙髓牙本质复合体的再生复合体结构，实现牙髓牙本质复合体的完整再生。通过将DPEM制备成可注射用材料，改善了DPEM制备过程中脱细胞制备时间、异种核酸残留量将进一步减少。将该DPEM注射材料中在牙髓‑牙本质交界表面添加了生长因子，有效调控细胞的粘附、迁移与分布，从而促进牙髓牙本质复合体的再生，实现牙髓组织的完整再生。

摘要： 本发明公开了一种修复脱矿牙本质并封闭牙本质小管的前驱体溶液及方法，属于生物材料技术领域。本发明可以修复脱矿牙本质并封闭牙本质小管，以基于胶原内矿化的过生长矿化为策略，其为聚合物诱导的磷酸钙液相矿化前驱体，其成分包括聚合物，磷酸钙，氯化钠。该液相矿化前驱体的制备步骤为：分别配制含钙母液与含磷母液，将一定量聚天冬氨酸溶液滴加入含钙溶液并轻轻混匀，再加入与含钙溶液等体积的含磷溶液，混合均匀。本发明原料易得，工艺简便，且能修复脱矿牙本质并深度封闭牙本质小管。

摘要： 本发明公开了血管紧张素转化酶抑制剂（卡托普利等）在牙本质粘结实验及临床的用途及方法。牙本质基质金属蛋白酶（MMPs）会降解牙本质胶原纤维，不利于牙本质粘结的稳定。所述的卡托普利等血管紧张素转化酶抑制剂，同时具有抑制MMPs的作用，其硫基（‑SH）与酶的Zn2+结合，中间的=CO基能与酶的氢键结合，而其末端的一个‑COOA基能与酶的精氨酸离子键结合，达到抑制胶原酶的目的。所述的卡托普利在牙本质粘结中的作用是抑制基质金属蛋白酶（MMPs）对牙本质胶原纤维的降解，从而提高牙本质粘结的稳定性与持久性。与传统的MMPs抑制剂（如氯己定）相比较，卡托普利具有更好的理化性质，在牙本质粘结的实验与临床研究中具有重要的应用价值。

摘要： 本实用新型提供一种后牙即刻种植牙本质备孔钻和牙本质备孔钻组，所述后牙即刻种植牙本质备孔钻包括一体化连接的钻柄(1)和钻头(2)，所述钻头(2)与钻柄(1)相接处形成有止动台阶；沿着远离所述钻柄(1)的方向，所述钻头(2)的横截面积逐渐减小，且所述钻头(2)上设有两个刃瓣和两个螺旋槽，两个所述刃瓣呈螺旋状沿所述钻头(2)的周圈设置。采用本申请中所述的牙本质备孔钻，逐级将牙本质备孔，以便牙根分叉处下面的牙槽骨的种植窝洞预备，从而利于完成牙齿即刻种植，采用这种工具和牙种植方式备孔时不容易偏斜，初期稳定性好，创口小容易愈合。

摘要： 本发明的课题在于提供高效的由牙髓细胞向成牙本质细胞的分化诱导方法，还提供能够高效地向成牙本质细胞分化诱导的分化诱导剂；所述由牙髓细胞向成牙本质细胞的分化诱导方法使用能够激活Wnt信号传导途径的物质；另外，所述分化诱导剂包含能够激活Wnt信号传导途径的物质；具体地说，所述物质是选自氯酸钠、高氯酸钠、氯化锂、Norrin和R-Spondin2中的任一种。

摘要： 本发明公开了诱导可逆性永生化前成牙本质细胞系及其建立方法。本发明细胞系是其引入了致永生化基因，在该基因的两端具有LoxP序列，同时该细胞系还表达Cre酶与雌激素受体蛋白的融合蛋白。这种融合蛋白由于体积过大无法进入细胞核，因此在正常情况下这种蛋白无法将基因组内的LoxP位点间的敲除。而当细胞接受一定浓度的4-OH-Tomaxifen刺激后，Cre两端的雌激素受体将脱落，Cre得以进入细胞核从而将去除基因组内的永生化基因编码序列，达到去永生化的目的。本发明为进一步研究成牙本质细胞生物学特性提供了理想的体外模型，同时也为牙本质再生修复和牙本质发育相关疾病机制研究提供理想的材料。

摘要： 本发明的课题在于提供高效的由牙髓细胞向成牙本质细胞的分化诱导方法，还提供能够高效地向成牙本质细胞分化诱导的分化诱导剂；所述由牙髓细胞向成牙本质细胞的分化诱导方法使用能够激活Wnt信号传导途径的物质；另外，所述分化诱导剂包含能够激活Wnt信号传导途径的物质；具体地说，所述物质是选自氯酸钠、高氯酸钠、氯化锂、Norrin和R-Spondin2中的任一种。

摘要： 使成牙本质细胞增殖·分化促进剂含有4‑(甲基)丙烯酰氧基乙基偏苯三酸的钙盐。

摘要： 本发明公开了诱导可逆性永生化前成牙本质细胞系及其建立方法。本发明细胞系是其引入了致永生化基因，在该基因的两端具有LoxP序列，同时该细胞系还表达Cre酶与雌激素受体蛋白的融合蛋白。这种融合蛋白由于体积过大无法进入细胞核，因此在正常情况下这种蛋白无法将基因组内的LoxP位点间的敲除。而当细胞接受一定浓度的4-OH-Tomaxifen刺激后，Cre两端的雌激素受体将脱落，Cre得以进入细胞核从而将去除基因组内的永生化基因编码序列，达到去永生化的目的。本发明为进一步研究成牙本质细胞生物学特性提供了理想的体外模型，同时也为牙本质再生修复和牙本质发育相关疾病机制研究提供理想的材料。