СПОСІБ ВИЗНАЧЕННЯ БАЦИЛЯРНИХ ЗБУДНИКІВ ХАРЧОВИХ ОТРУЄНЬ ТА ПСУВАННЯ ХАРЧОВИХ ПРОДУКТІВ ЗА ГЕНАМИ ТОКСИЧНОСТІ

摘要

Спосіб визначення бацилярних збудників харчових отруєнь та псування харчових продуктів включає підготування дослідних зразків, виділення мікроорганізмів, виділення геномів ДНК попередньо виділених мікроорганізмів, проведення мультиплексної полімеразної ланцюгової реакції з використанням прямих і зворотних праймерів і електрофорез продуктів мультиплексної полімеразної ланцюгової реакції з використанням маркерів нуклеотидних фрагментів. Здійснюють мультиплексну полімеразну ланцюгову реакцію із системи, яка містить геноми декількох мікроорганізмів з використанням наступних пар праймерів: nheAF і nheAR по 0,15-0,25 мкМ; 29PpF і 179PpR по 0,15-0,22 мкМ; МАС 1 і МАС 2 по 0,1-0,2 мкМ. При цьому мультиплексну полімеразну ланцюгову реакцію проводять в наступній послідовності: первинна денатурація при 94-95 °C протягом 3-5 хв, далі - 30 циклів, кожен з яких включає денатурацію при 94 °C протягом 30-60 с, відпал при 51-56 °C протягом 30 с, первинну елонгацію при 72 °C протягом 30 с. Після цього здійснюють остаточну елонгацію при 72 °C протягом 3-5 хв.