一种大片段DNA克隆载体的构建方法

摘要

本发明公开了一种简单快捷构建克隆载体的方法，简称LJY法和用此方法已构建好的4个克隆载体。本发明以pBR322的AmpR基因和ori复制起始点为骨架，通过独特的引物设计方法和平端连接，可简单快速地在新构建的克隆载体质粒中引入所需的限制性内切酶识别位点，并有效地提高载体的外源基因容量和稳定性，避免大片段基因克隆时常出现的目的基因意外突变等问题。