含卤原子手性中心的化合物及其制备方法、应用和含卤原子手性的天然产物的制备方法

摘要

本发明涉及一种含卤原子手性中心的化合物及其制备方法、应用和含卤原子手性的天然产物的制备方法。上述含卤原子手性中心的化合物的制备方法包括如下步骤：将化合物1和化合物2在路易斯酸和有机碱的催化作用下进行反应，然后纯化，制备含卤原子手性中心的化合物，其中，化合物1的结构式为

说明书

技术领域

本发明涉及有机合成领域，特别是涉及一种含卤原子手性中心的化合物及其制备方法、应用和含卤原子手性的天然产物的制备方法。

背景技术

卤素原子具有一些特殊的性质，卤原子外周密集的电子云使它具有亲核性，表现出路易斯碱的性质。同时，由于卤素原子的σ-hole效应，在碳卤键的反键轨道是缺电子的，表现出路易斯酸的性质。卤素原子的特殊性质使其在药物研究中发挥了重要作用，很多实验表明，在候选化合物中引入卤素原子之后，候选化合物的亲和力和药代动力学性质都得到了很大的改善。在已经发现的药物和正在开发的药物候选化合物中，含氯的化合物占有很高的比例。

但是在化合物中引入氯原子并不容易，特别是得到含氯手性中心的化合物。此外，虽然很多分离的含氯的天然产物都表现出较好的抗癌或抗炎等生物活性，但由于分离量极少和合成方法受限，很多含氯手性的天然产物的生物活性未能得到进一步的探索。因此，如何在化合物中引入含氯手性中心的化合物，并有望用于药物研发中是研究人员亟待解决的问题。

发明内容

基于此，有必要提供一种含卤原子手性中心的化合物的制备方法，该方法采用非对映选择性构建含卤原子手性中心，合成简单，且该方法能够应用于制备含卤原子手性的天然产物中。

此外，还有必要提供一种含卤原子手性中心的化合物、应用和含卤原子手性的天然产物的制备方法。

一种含卤原子手性中心的化合物的制备方法，包括如下步骤：将化合物1和化合物2在路易斯酸和有机碱的催化作用下进行反应，然后纯化，制备含卤原子手性中心的化合物，其中，所述化合物1的结构式为

所述R为氢，所述含卤原子手性中心的化合物的结构式为

在其中一个实施例中，所述路易斯酸选自AlCl

在其中一个实施例中，所述化合物1和所述化合物2的摩尔比为1:(1～1.5)。

在其中一个实施例中，反应的温度为0℃～25℃；及/或，反应的时间为6h～12h。

在其中一个实施例中，所述纯化的步骤包括：在反应结束后，向反应体系中加入水淬灭反应，然后加入盐酸水溶液，分离有机相和水相，所述水相用有机溶剂萃取与所述有机相合并，将合并后的所述有机相经洗涤、干燥、浓缩及柱层析处理，得到纯化后的所述含卤原子手性中心的化合物。

在其中一个实施例中，所述R

在其中一个实施例中，所述化合物1选自以下结构式中的一种：

在其中一个实施例中，所述化合物1与所述路易斯酸和所述有机碱的总摩尔比为1:(1.3～5)。

在其中一个实施例中，所述R为C

在其中一个实施例中，所述化合物1的结构式为

在其中一个实施例中，所述化合物1的结构式为

在其中一个实施例中，所述化合物1的结构式为

所述化合物1的结构式为

一种含卤原子手性中心的化合物，所述含卤原子手性中心的化合物的结构式为

所述R为氢，所述含卤原子手性中心的化合物的结构式为

在其中一个实施例中，所述含卤原子手性中心的化合物由上述的含卤原子手性中心的化合物的制备方法制备得到。

上述的含卤原子手性中心的化合物在制备含卤原子手性的天然产物中的应用。

一种含卤原子手性的天然产物的制备方法，包括如下步骤：

将含卤原子手性中心的化合物和氢化铝锂进行还原反应，然后将反应后的产物与原甲酸三乙酯、对甲苯磺酸反应，制备化合物3；其中，所述含卤原子手性中心的化合物的结构式为

将所述化合物3和臭氧、二甲硫醚反应，然后将反应后的产物和氢化钠、磷酸酯反应，制备化合物4，所述化合物4的结构式为

将所述化合物4和三氟乙酸反应，然后将反应后的产物和甲基三苯基溴化磷、双(三甲基硅烷基)氨基钾反应，然后纯化，制备含卤原子手性的天然产物，所述含卤原子手性的天然产物的结构式为

在其中一个实施例中，所述将所述化合物3和臭氧、二甲硫醚反应的步骤包括：先将所述化合物3和所述臭氧在-40℃～-78℃下反应，然后加入所述二甲硫醚，在10℃～30℃下继续反应；及/或，

所述将反应后的产物和氢化钠、磷酸酯反应的步骤包括：在0℃～10℃下，向氢化钠的甲苯溶液中加入磷酸酯的甲苯溶液，然后将反应体系的温度降至-40℃～-78℃，将所述化合物3和臭氧、二甲硫醚反应后的产物的甲苯溶液加入所述反应体系中，然后将所述反应体系升温至0℃～10℃继续反应；及/或，

所述将反应后的产物和甲基三苯基溴化磷、双(三甲基硅烷基)氨基钾反应的步骤包括：在0℃～10℃下，向甲基三苯基溴化磷的甲苯溶液中加入双(三甲基硅烷基)氨基钾的甲苯溶液，然后升温至10℃～30℃继续反应0.5h～1h，再降温至-40℃～-78℃，加入所述化合物4和所述三氟乙酸反应后的产物的甲苯溶液进行反应。

一种含卤原子手性的天然产物的制备方法，包括如下步骤：

将含卤原子手性中心的化合物和氢化铝锂进行还原反应，然后将反应后的产物和四溴化碳、三苯基膦反应，制备化合物5，所述含卤原子手性中心的化合物的结构式为

将所述化合物5和亚磷酸二甲酯、三乙胺进行反应，制备化合物6，所述化合物6的结构式为

将所述化合物6和锇酸钾、N-甲基-N-氧化吗啉进行反应，反应后的产物继续与高碘酸反应，然后将反应后的产物与磷酸酯和碱反应，制备化合物7，所述化合物7的结构式为

将所述化合物7与二甲基二茂钛反应，然后纯化，制备含卤原子手性的天然产物，所述含卤原子手性的天然产物的结构式为

在其中一个实施例中，所述将所述化合物7与二甲基二茂钛反应的步骤中，反应温度为60℃～80℃，反应时间为2h～4h；及/或，所述纯化的步骤包括：向反应体系中加入饱和氯化铵溶液淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，合并有机相，将合并后的有机相经饱和氯化钠水溶液洗涤、干燥、浓缩和柱层析分离，得到纯化后的所述含卤原子手性的天然产物。

上述含卤原子手性中心的化合物的制备方法将化合物1和含有酰基的化合物2在路易斯酸和有机碱的作用下进行酰基-克莱森重排(Acyl Claisen重排)反应，非对映选择性构建含卤原子的手性中心，所制备的化合物的非对映选择性高。且该方法提供了一种非对映选择性构建含卤原子手性中心的思路，能够用于含卤原子天然产物的制备合成中，丰富含卤原子天然产物的来源，对于药物研发中引入手性卤原子的先导化合物合成与修饰以及合成已分离报道的含卤原子天然产物具有重要意义。

附图说明

图1为一实施方式的含卤原子手性的天然产物的制备方法的工艺流程图；

图2为另一实施方式的含卤原子手性的天然产物的制备方法的工艺流程图。

具体实施方式

为了便于理解本发明，下面将结合具体实施方式对本发明进行更全面的描述。具体实施方式中给出了本发明的较佳的实施例。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。

除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体地实施例的目的，不是旨在于限制本发明。

需要说明的是，在本文中，Ph表示苯基，Me表示甲基，Et表示乙基，Bu表示丁基。室温表示温度为10℃～30℃。

本发明的目的是提供一种通过非对映选择性制备含卤原子手性中心的化合物的方法，并将该方法应用到含卤原子手性的天然产物的制备中，丰富了含卤原子手性的天然产物的来源。

具体地，一实施方式的含卤原子手性中心的化合物的制备方法，包括如下步骤：

将化合物1和化合物2在路易斯酸和有机碱的催化作用下进行反应，然后纯化，制备含卤原子手性中心的化合物。

其中，化合物1的结构式为

具体地，上述结构式中，R

具体地，路易斯酸选自AlCl

在其中一个实施例中，化合物1和化合物2的摩尔比为1:(1～1.5)。

具体地，反应的温度为0℃～25℃。反应的时间为6h～12h。反应过程中可以通过TLC监测反应原料是否消耗完来判断反应是否结束。

通过将化合物1和含有酰基的化合物2在路易斯酸和有机碱的作用下进行酰基-克莱森重排(Acyl Claisen重排)反应，非对映选择性构建含卤原子的手性中心，所制备的化合物的产率高，且非对映选择性高。

当R为氢时与R为烷基或烷基取代的苯基时，所制备的含卤原子手性中心的化合物的构型不同，以下分R为H，以及R为烷基或烷基取代的苯基两种情况分别进行描述。

(一)R为H时，即化合物2为

具体地，R

R

在其中一个实施例中，化合物1选自以下结构式中的一种：

对应地，X为氯时，含卤原子手性中心的化合物选自以下结构式中的一种：

具体地，反应的温度为0℃～25℃。反应的时间为6h～12h。化合物1和化合物2的摩尔比为1:(1～1.5)。化合物1与路易斯酸和有机碱的总摩尔比为1:(1.3～5)。

在其中一个实施例中，纯化的步骤包括：在反应结束后，向反应体系中加入水淬灭反应，然后加入盐酸水溶液，分离有机相，水相用有机溶剂萃取后，合并有机相，将合并后的有机相经洗涤、干燥、浓缩及柱层析处理，得到纯化后的含卤原子手性中心的化合物。其中，洗涤的步骤中，用饱和氯化钠溶液洗涤。柱层析处理的步骤中，所用的淋洗剂为石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂，在其中一个实施例中，石油醚和乙酸乙酯的体积比为10:1。

在其中一个实施例中，将化合物1和化合物2在路易斯酸和有机碱的催化作用下进行反应的步骤包括：在0℃下，向含有路易斯酸、有机溶剂和化合物1的溶液中加入有机碱，滴加结束后，搅拌15min，然后向反应体系中滴入化合物2进行反应，使溶液自然升温至室温，用TLC监测反应进程。

在其中一个实施例中，有机溶剂为二氯甲烷。

(二)R为烷基或烷基取代的苯基，此时，含卤原子手性中心的化合物的结构式为

具体地，R

在其中一个实施例中，化合物1选自以下结构式中的一种：

进一步地，在其中一个实施例中，化合物1的结构式为

在该实施例中，化合物1与路易斯酸和有机碱的总摩尔比为1:(1.3～5)。

在另一个实施例中，化合物1的结构式为

在又一个实施例中，化合物1的结构式为

在又一个实施例中，化合物1的结构式为

上述含卤原子手性中心的化合物的制备方法至少具有以下优点：

(1)上述含卤原子手性中心的化合物的制备方法通过将化合物1和含有酰基的化合物2在路易斯酸和有机碱的作用下进行酰基-克莱森重排(Acyl Claisen重排)反应，非对映选择性构建含卤原子的手性中心，所制备的化合物的产率高，且非对映选择性高。

(2)上述含卤原子手性中心的化合物的制备方法能够制备得到顺式或反式含连续双卤原子手性中心的化合物，从而用于含卤原子手性的天然产物的制备中，丰富了含卤原子手性的天然产物的来源。

一实施方式的含双卤原子手性中心的化合物，结构式为

R为氢，含卤原子手性中心的化合物的结构式为

进一步地，含卤原子手性中心的化合物由上述实施方式的含卤原子手性的化合物的合成方法制备得到。

上述含卤原子手性中心的化合物能够用于制备含卤原子手性的天然产物中，丰富了含卤原子天然产物的来源，对于药物研发中引入手性卤原子的先导化合物合成与修饰以及合成已分离报道的含卤原子天然产物具有重要意义。

一实施方式的含双卤原子手性中心的化合物在制备含卤原子手性的天然产物中的应用。

请参阅图1，一实施方式的含卤原子手性的天然产物的制备方法，包括如下步骤：

步骤S110：将含卤原子手性中心的化合物和氢化铝锂进行还原反应，然后将反应后的产物和原甲酸三乙酯、对甲苯磺酸反应，制备化合物3。

其中，含卤原子手性中心的化合物的结构式为

其中，化合物3的结构式为

具体地，还原反应的温度为-40℃～-78℃。反应时间为20min。将含卤原子手性中心的化合物和氢化铝锂进行还原反应的步骤包括：在-40℃～-78℃条件下，向含卤原子手性中心的化合物的四氢呋喃溶液中滴加氢化铝锂的四氢呋喃溶液进行反应，20min后向反应液中加入盐酸水溶液，调节反应液的pH为中性。将反应液升温至室温，加入饱和的酒石酸钾钠溶液进行淬灭，分离有机相和水相，并用乙酸乙酯对水相进行萃取，合并有机相，将有机相经洗涤、干燥、浓缩。具体地，采用饱和氯化钠水溶液对有机相进行洗涤。进一步地，氢化铝锂和含卤原子手性中心的化合物的摩尔比为1.2:1。可以理解，上述仅列出了氢化铝锂还原反应的一种常用方法，反应过程中的工艺参数并限于此，还可以根据本领域的公知常识进行调整。

将反应后的产物和原甲酸三乙酯、对甲苯磺酸反应，制备化合物3的步骤包括：将反应后的产物和原甲酸三乙酯、一水合对甲苯磺酸在二氯甲烷中反应，反应结束后，向反应液中加入饱和碳酸氢钠溶液继续搅拌，然后分离有机相和水相。水相进行萃取，并合并有机相。将有机相经洗涤、干燥、浓缩和柱层析分离，得到纯化后的化合物3。具体地，柱层析中所用的淋洗液为石油醚和乙酸乙酯的混合物。进一步地，石油醚和乙酸乙酯的体积比为100:1。

步骤S120：将化合物3和臭氧、二甲硫醚反应，然后将反应后的产物和氢化钠、磷酸酯反应，制备化合物4。

其中，化合物4的结构式为

具体地，将化合物3和臭氧、二甲硫醚反应的步骤包括：先将化合物3和臭氧在-40℃～-78℃下反应，然后加入二甲硫醚，在10℃～30℃下继续反应。

进一步地，将化合物3和臭氧在-40℃～-78℃下反应的步骤中，通过TLC监测反应过程。加入二甲硫醚，在10℃～30℃下继续反应的时间为2h。加入二甲硫醚，在10℃～30℃下继续反应的步骤之后，还包括：将反应液浓缩，向浓缩后的反应液中加入乙醚，分离有机相，并用水和饱和氯化钠洗涤、干燥，浓缩，得到反应后的产物。

将反应后的产物和氢化钠、磷酸酯反应的步骤包括：在0℃～10℃下，向氢化钠的甲苯溶液中滴加磷酸酯的甲苯溶液，滴加结束后将反应体系的温度降至-40℃～-78℃，将化合物3和臭氧、二甲硫醚反应后的产物的甲苯溶液滴加至反应体系中，然后将反应体系升温至0℃～10℃继续反应。反应过程中，通过TLC监测反应进程。待反应原料消耗完毕后，向反应体系中加入5％的乙酸水溶液淬灭反应，然后用正己烷萃取，合并有机相，经洗涤、干燥、浓缩及柱层析，得到纯化后的化合物4。具体地，氢化钠和化合物3的摩尔比为3:1。磷酸酯和化合物3的摩尔比为5:1。可以理解，氢化钠、磷酸酯和化合物3的摩尔比不限于为上述值，还可以为本领域常用的HWE反应中的用量比。

步骤S130：将化合物4和三氟乙酸反应，然后将反应后的产物和甲基三苯基溴化磷、双(三甲基硅烷基)氨基钾反应，然后纯化，制备含卤原子手性的天然产物。

其中，含卤原子手性的天然产物的结构式为

具体地，将化合物4和三氟乙酸反应的步骤包括：在0℃下，向化合物4的氯仿溶液中滴加过量的三氟乙酸，然后升温至50℃继续反应8h至TLC监测反应结束。将反应体系降温至室温，除去氯仿和过量的三氟乙酸。然后加入二氯乙烷，并滴加饱和碳酸氢钠溶液调节pH为中性。分离有机相，水相用二氯甲烷萃取，合并有机相，并经饱和氯化钠溶液洗涤、无水硫酸钠干燥和浓缩，得到反应后的产物。

将反应后的产物和甲基三苯基溴化磷、双(三甲基硅烷基)氨基钾反应的步骤包括：在0℃～10℃下，向甲基三苯基溴化磷的甲苯溶液中滴加双(三甲基硅烷基)氨基钾的甲苯溶液，滴加结束后，继续反应2h，然后升温至10℃～30℃继续反应0.5h～1h，再降温至-40℃～-78℃，滴加化合物4和三氟乙酸反应后的产物的甲苯溶液，滴加结束后继续反应1h。待反应结束后，向反应体系中加入饱和的氯化铵水溶液淬灭反应，用乙醚萃取，合并有机相，并依次经饱和氯化钠洗涤、无水硫酸钠干燥、浓缩及柱层析分离，得到纯化后的含卤原子手性的天然产物。

进一步地，甲基三苯基溴化磷和化合物4的摩尔比为2:1。双(三甲基硅烷基)氨基钾(KHMDS)和化合物4的摩尔比为1.5:1。可以理解，甲基三苯基溴化磷、KHMDS和化合物4的摩尔比不限于为上述值，还可以为本领域常用的Wittig反应中的用量比。

具体地，上述含卤原子手性的天然产物的合成路线如下所示：

上述含卤原子手性的天然产物的制备方法至少具有以下优点：

(1)上述含卤原子手性的天然产物的制备方法先利用非对映选择性构建含连续双卤原子的手性中心，然后经一系列反应制备得到含卤原子手性的天然产物多卤化单萜，该化合物具有较好的生物活性，能够用于抗癌或抗炎药物的研发中。

(2)上述含卤原子手性的天然产物的制备方法的产率相对较高，合成简单。

请参阅图2，另一实施方式的含卤原子手性的天然产物的制备方法，包括如下步骤：

步骤S210：将含卤原子手性中心的化合物和氢化铝锂进行还原反应，然后将反应后的产物和四溴化碳、三苯基膦反应，制备化合物5。

其中，含卤原子手性中心的化合物的结构式为

其中，化合物5的结构式为

具体地，还原反应的温度为-40℃。反应时间为20min。将含卤原子手性中心的化合物和氢化铝锂进行还原反应的步骤包括：在-40℃条件下，向含卤原子手性中心的化合物的四氢呋喃溶液中滴加氢化铝锂的四氢呋喃溶液进行反应，20min后向反应液中加入盐酸水溶液，调节反应液的pH为中性。将反应液升温至室温，加入饱和的酒石酸钾钠溶液进行淬灭，分离有机相和水相，并用乙酸乙酯对水相进行萃取，合并有机相，将有机相经洗涤、干燥、浓缩，得到反应后的产物。具体地，采用饱和氯化钠水溶液对有机相进行洗涤。进一步地，氢化铝锂和含卤原子手性中心的化合物的摩尔比为1.2:1。可以理解，上述仅列出了氢化铝锂还原反应的一种常用方法，反应过程中的工艺参数并不限于此，还可以根据本领域的公知常识进行调整。

将反应后的产物和四溴化碳、三苯基膦反应，制备化合物5的步骤包括：在0℃下，向含卤原子手性中心的化合物和氢化铝锂反应后的产物的二氯甲烷溶液中加入四溴化碳和三苯基膦，然后升温至室温，搅拌反应，用TLC监测反应结束，除去溶剂，经柱层析分离得到纯化后的化合物5。具体地，四溴化碳和含卤原子手性中心的化合物的摩尔比为2:1。三苯基膦和含卤原子手性中心的化合物的摩尔比为4:1。

具体地，将反应后的产物和四溴化碳、三苯基膦进行Corey-Fuchs反应生成二溴烯烃，可以理解，上述仅列出了Corey-Fuchs反应的一些常用工艺参数，反应过程中的工艺参数并不限于此，还可以根据本领域的Corey-Fuchs反应进行调整。

步骤S220：将化合物5和亚磷酸二甲酯、三乙胺进行反应，制备化合物6。

其中，化合物6的结构式为

将化合物5和亚磷酸二甲酯、三乙胺进行反应的步骤中，反应温度为10℃～30℃。反应过程中通过TLC监测反应原料是否消耗完。进一步地，亚磷酸二甲酯和化合物5的摩尔比为4:1。三乙胺和化合物5的摩尔比为5:1。可以理解，上述仅列出了反应中的一种常用参数，但反应过程中的工艺参数并不限于此，还可以根据本领域常用的工艺参数进行调整。

具体地，反应结束后还包括纯化的步骤，纯化的步骤为：向反应体系中加入饱和氯化铵溶液进行淬灭，然后用乙醚萃取，将有机相合并，经饱和氯化钠溶液洗涤、无水硫酸钠干燥、浓缩和柱层析分离，得到纯化后的化合物6。

步骤S230：将化合物6和锇酸钾二水合物、N-甲基-N-氧化吗啉进行反应，反应后的产物继续与高碘酸反应，然后将反应后的产物与磷酸酯和碱反应，制备化合物7。

其中，化合物7的结构式为

具体地，将化合物6和锇酸钾二水合物、N-甲基-N-氧化吗啉进行反应的步骤中，在室温下进行，反应时间为24h。反应过程中通过TLC监测反应原料是否消耗完。进一步地，锇酸钾二水合物与化合物6的摩尔比为0.05:1。N-甲基-N-氧化吗啉与化合物6的摩尔比为1.5:1。

将化合物6和锇酸钾二水合物、N-甲基-N-氧化吗啉进行反应的步骤之后还包括：向反应体系中加入饱和的硫代硫酸钠水溶液淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，合并有机相，经饱和氯化钠水溶液洗涤、无水硫酸钠干燥、浓缩和柱层析分离，得到反应后的产物。

将反应后的产物与高碘酸反应的步骤中，在室温下进行，反应时间为2h。反应过程中通过TLC监测反应原料是否消耗完。进一步地，高碘酸和化合物6的摩尔比为2:1。具体地，将反应后的产物与高碘酸反应的步骤之后，还包括：将反应液经饱和氯化钠洗涤、无水硫酸钠干燥和浓缩得到纯化后的反应产物。

将反应后的产物与磷酸酯和碱反应的步骤中，碱为二异丙基乙胺和氯化锂。反应过程中还加入了乙腈。具体地，该步骤包括：将磷酸酯、二异丙基乙胺、氯化锂和乙腈混合搅拌1h以上，然后将与高碘酸反应后的产物的乙腈溶液滴加进反应体系中，搅拌反应7h。反应过程中，通过TLC监测反应原料是否消耗完。进一步地，反应温度为0℃～30℃。在其中一个实施例中，磷酸酯和化合物6的摩尔比为2:1，二异丙基乙胺与化合物6的摩尔比为1.2:1，氯化锂与化合物6的摩尔比为1.5:1。在另一个实施例中，反应温度为10℃～30℃，反应时间为8h～12h。磷酸酯和化合物6的摩尔比为1.2:1，二异丙基乙胺与化合物6的摩尔比为1:1，氯化锂与化合物6的摩尔比为1:1。进一步地，反应过程中也可以不加入乙腈。

将反应后的产物与磷酸酯和碱反应的步骤之后还包括：向反应体系中加入饱和氯化铵溶液淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，合并有机相，经饱和氯化钠水溶液洗涤、无水硫酸钠干燥、浓缩和柱层析分离，得到纯化后的化合物7。

在一些实施例中，将反应后的产物与磷酸酯和碱反应的步骤中，碱为氢化钠，反应过程中还加入了甲苯，具体地，该步骤包括：将NaH经过正己烷洗涤预处理之后，加入甲苯中，然后将反应体系冷却至0℃，将磷酸酯的甲苯溶液缓慢滴加至反应体系当中。在0℃下搅拌一个小时之后，将反应体系的温度降至-78℃，将与高碘酸反应后的产物的甲苯溶液缓慢滴加至反应体系之中，使反应体系缓慢升至0℃(大约6个小时)，TLC监测显示原料已经消耗完毕。向反应体系中加入5％的乙酸水溶液淬灭，用正己烷萃取三次。合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。将有机相浓缩，使用柱层析分离得到纯化后的化合物7。具体地，氢化钠与化合物6的摩尔比为3:1，磷酸酯与化合物6的摩尔比为5:1。

进一步地，反应温度还可以为-40℃～30℃，反应时间为4h。进一步地，甲苯还可以用乙腈替代。

在另一些实施例中，将反应后的产物与磷酸酯和碱反应的步骤中，碱为DBU和NaI，反应过程中还加入了甲苯。反应过程与加入氢化钠和甲苯的反应过程相似，在此不再赘述。具体地，DBU与化合物6的摩尔比为1:1，NaI与化合物6的摩尔比为1.2:1，磷酸酯与化合物6的摩尔比为1.2:1。

在另一些实施例中，将反应后的产物与磷酸酯和碱反应的步骤中，碱为正丁基锂，反应过程中还加入了甲苯。反应过程与加入氢化钠和甲苯的反应过程相似，在此不再赘述。具体地，叔丁基锂和化合物6的摩尔比为1.2:1，磷酸酯与化合物6的摩尔比为2:1。另外，正丁基锂和化合物6的摩尔比还可以为2:1，此时，磷酸酯与化合物6的摩尔比为4:1。

在另一些实施例中，将反应后的产物与磷酸酯和碱反应的步骤中，碱为t-BuONa，反应过程中还加入了甲苯，反应过程与加入氢化钠和甲苯的反应过程相似，在此不再赘述。具体地，t-BuONa与化合物6的摩尔比为2:1，磷酸酯与化合物6的摩尔比为4:1。另外，甲苯还可以用四氢呋喃替代。

步骤S240：将化合物7与二甲基二茂钛反应，然后纯化，制备含卤原子手性的天然产物。

其中，含卤原子手性的天然产物的结构式为

将化合物7与二甲基二茂钛(Petasis试剂)反应的步骤中，温度为60℃～80℃，反应时间为2h～4h。反应过程中通过TLC监测原料是否消耗完毕。

纯化的步骤包括：向反应体系中加入饱和氯化铵溶液淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，合并有机相，经饱和氯化钠水溶液洗涤、无水硫酸钠干燥、浓缩和柱层析分离，得到含卤原子手性的天然产物。

上述天然产物的合成路线具体如下所示：

上述含卤原子手性的天然产物的制备方法至少具有以下优点：

(1)上述含卤原子手性的天然产物的制备方法先利用非对映选择性构建含连续双卤原子的手性中心，然后经一系列反应制备得到含卤原子手性的天然产物多卤化单萜，该化合物具有较好的生物活性，能够用于抗癌或抗炎药物的研发中。

(2)上述含卤原子手性的天然产物的制备方法的产率相对较高，合成简单。

以下为具体实施例部分：

实施例1

实施例1～实施例16的含卤原子手性中心的化合物的制备过程中所用的原料化合物2为

实施例1～实施例16的含卤原子手性中心的化合物的制备过程具体如下：

将0.5摩尔当量的三氯化铝(83mg)在手套箱里面称量好放入一个装有搅拌子的反应瓶中。在常温下，往反应瓶中加入新蒸制的DCM(2mL)，然后加入1摩尔当量的化合物1。将反应瓶置于冰水混合物中使其温度降至0℃，往反应液中滴入1.5摩尔当量的二异丙基乙胺(0.3mL)。滴加完成后，挪走冰浴，在常温下搅拌15分钟。然后将反应体系重新置入冰浴中，滴入1.2摩尔当量的化合物2(0.15mL)，使反应体系自然升到室温，用TLC监测反应进程。等反应结束以后，向反应液中加入等量的DCM稀释，然后缓慢加入冰水淬灭反应，得到悬浊液。向反应体系的悬浊液中加入1mol/L的盐酸水溶液，直到反应体系中悬浊的固体消失。将有机层分离出来，水相用DCM再萃取两遍。合并有机相，有机相依次用饱和氯化钠溶液洗涤、无水硫酸钠干燥、浓缩，然后使用柱层析分离，淋洗液为PE/EA＝10:1(体积比)，得到纯化后的含卤原子手性中心的化合物。含卤原子手性中心的化合物的产率和dr值如下表1所示。

表1化合物1的结构及含卤原子手性中心的化合物的产率和dr值数据

实施例17～实施例22

实施例17～实施例22的含卤原子手性中心的化合物的制备过程中所用的原料化合物1的结构式为

实施例17～实施例22的含反式的连续双卤原子手性中心的化合物的合成过程具体如下：

将M摩尔当量的三氯化铝在手套箱里面称量好放入一个装有搅拌子的反应瓶中。在常温下，往反应瓶中加入新蒸制的DCM，然后加入1摩尔当量的化合物1。将反应瓶置于冰水混合物中使其温度降至0℃，往反应液中滴入N摩尔当量的二异丙基乙胺。滴加完成后，挪走冰浴，在常温下搅拌15分钟。然后将反应体系重新置入冰浴中，滴入1.2摩尔当量的化合物2，使反应体系自然升到室温，用TLC监测反应进程。等反应结束以后，向反应液中加入等量的DCM稀释，然后缓慢加入冰水淬灭反应，得到悬浊液。向反应体系的悬浊液中加入1mol/L的盐酸水溶液，直到反应体系中悬浊的固体消失。将有机层分离出来，水相用DCM再萃取两遍。合并有机相，有机相依次用饱和氯化钠溶液洗涤、无水硫酸钠干燥、浓缩，然后使用柱层析分离，淋洗液为PE/EA＝10:1(体积比)，得到纯化后的含卤原子手性中心的化合物。催化剂的摩尔当量及含卤原子手性中心的化合物的产率和dr值如表2所示。

表2催化剂的摩尔当量及含卤原子手性中心的化合物的产率和dr值

需要说明的是，表2中用R

实施例23～实施例28

实施例23～实施例28的含卤原子手性中心的化合物的制备过程中所用的原料化合物1的结构式为

实施例23～实施例28的含顺式的连续双卤原子手性中心的化合物的合成过程具体如下：

将M摩尔当量的三氯化铝在手套箱里面称量好放入一个装有搅拌子的反应瓶中。在常温下，往反应瓶中加入新蒸制的DCM，然后加入1摩尔当量的化合物1。将反应瓶置于冰水混合物中使其温度降至0℃，往反应液中滴入N摩尔当量的二异丙基乙胺。滴加完成后，挪走冰浴，在常温下搅拌15分钟。然后将反应体系重新置入冰浴中，滴入1.2摩尔当量的化合物2，使反应体系自然升到室温，用TLC监测反应进程。等反应结束以后，向反应液中加入等量的DCM稀释，然后缓慢加入冰水淬灭反应，得到悬浊液。向反应体系的悬浊液中加入1mol/L的盐酸水溶液，直到反应体系中悬浊的固体消失。将有机层分离出来，水相用DCM再萃取两遍。合并有机相，有机相依次用饱和氯化钠溶液洗涤、无水硫酸钠干燥、浓缩，然后使用柱层析分离，淋洗液为PE/EA＝10:1(体积比)，得到纯化后的含卤原子手性中心的化合物。各实施例中催化剂的摩尔当量、化合物2和含卤原子手性中心的化合物的结构式及含卤原子手性中心的化合物的产率和dr值如表3所示。

表3催化剂的摩尔当量及含卤原子手性中心的化合物的产率和dr值

实施例29

本实施例的含卤原子手性的天然产物的合成路线如下所示：

本实施例的含卤原子手性的天然产物的合成过程具体如下：

(1)将2摩尔当量的三氯化铝在手套箱里面称量好放入一个装有搅拌子的反应瓶中。在常温下，往反应瓶中加入新蒸制的DCM，然后加入1摩尔当量的化合物1。将反应瓶置于冰水混合物中使其温度降至0℃，往反应液中滴入3摩尔当量的二异丙基乙胺。滴加完成后，挪走冰浴，在常温下搅拌15分钟。然后将反应体系重新置入冰浴中，滴入1.2摩尔当量的化合物2，使反应体系自然升到室温，用TLC监测反应进程。等反应结束以后，向反应液中加入等量的DCM稀释，然后缓慢加入冰水淬灭反应，得到悬浊液。向反应体系的悬浊液中加入1mol/L的盐酸水溶液，直到反应体系中悬浊的固体消失。将有机层分离出来，水相用DCM再萃取两遍。合并有机相，有机相依次用饱和氯化钠溶液洗涤、无水硫酸钠干燥、浓缩，然后使用柱层析分离，淋洗液为PE/EA＝10:1(体积比)，得到纯化后的含卤原子手性中心的化合物。含卤原子手性中心的化合物的产率为90％，dr值为6:1，ee值为96％。

(2)将含卤原子手性中心的化合物(1.25g,3.52mmol,1equiv.)溶在经过钠干燥的无水四氢呋喃中(35ml)，在-40℃的温度下缓慢滴加1.2当量的溶于四氢呋喃的氢化铝锂(1.8mL,4.22mmol,1.2equiv.,2.4M/L)。大约反应20分钟之后。在-40℃的温度下，滴加1M/L的盐酸水溶液，将反应液的pH调至中性。将反应液升至室温，加入饱和的酒石酸钾钠水溶液淬灭。将有机层分离出来，水相用乙酸乙酯再萃取两遍。合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。将有机相浓缩后直接用于下一步。

(3)将上述步骤中的得到的产物溶于干燥的DCM(852.5mg,3.16mmol,1equiv.)中，在常温下加入10当量的原甲酸三乙酯(5.3mL,31.6mmol,10equiv.)和0.1当量的一水合对甲苯磺酸(60mg,0.31mmol,0.1equiv.)。在室温下搅拌两个小时，TLC监测显示原料已经消耗完毕。向反应体系中加入饱和的碳酸氢钠水溶液，在室温下再搅拌30分钟。将有机层分离出来，水相用DCM再萃取两遍。合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。将有机相浓缩，使用柱层析(PE/EA＝100:1)分离得到纯的化合物3。化合物3的产率为75％。

(4)将化合物3(805mg,2.34mmol)溶在DCM中，将温度降至-78℃中，通入臭氧。大约十分钟之后，TLC监测显示原料已经消耗完毕。向反应体系中加入二甲硫醚，挪至常温继续搅拌两小时。将反应液旋转蒸发浓缩，加入乙醚，有机相先后用水和饱和的氯化钠水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。将有机相浓缩后直接用于下一步。

(5)将3当量的NaH(0.35g,9mmol,3equiv.)经过正己烷洗涤预处理之后，加入甲苯(20mL)。将反应体系冷却至0℃，将5当量的磷酸酯(3.4g,15mmol,5equiv.)溶于甲苯(8mL)中缓慢滴加至反应体系当中。在0℃下搅拌一个小时之后，将反应体系的温度降至-78℃，上述步骤(4)得到的产物溶于甲苯后缓慢滴加至反应体系之中。使反应体系缓慢升至0℃(大约6个小时)，TLC监测显示原料已经消耗完毕。向反应体系中加入5％的乙酸水溶液淬灭，用正己烷萃取三次。合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。将有机相浓缩，使用柱层析分离得到纯的化合物4。化合物4的产率为32％。

(6)将化合物4(100mg,0.285mmol,1equiv.)溶解在氯仿里面，冷却至0℃，随后往里面滴加过量的三氟乙酸(1mL)。将反应温度升至50℃，搅拌8个小时直到TLC监测显示原料已经消耗完毕。将反应体系冷却至室温，通过旋蒸除去溶剂氯仿和三氟乙酸，向剩余物中加入DCM。向剩余体系中缓慢滴加饱和碳酸氢钠水溶液，调整pH至中性。将有机层分离出来，水相用DCM再萃取两遍。合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。将有机相浓缩后直接用于下一步。

(7)将两当量的甲基三苯基溴化磷(200mg,0.56mmol,2equiv.)溶在甲苯(2mL)里面，冷却至0℃。向反应体系中缓慢滴加1.5当量KHMDS(0.7mL,0.43mmol,1.5equiv.,0.6M/Lin toluene)。使反应体系在0℃反应两个小时之后挪至室温，继续反应半个小时。将反应体系的温度降至-78℃，上述步骤(6)得到的化合物的粗品溶于甲苯后缓慢滴加至反应体系之中。反应体系在-78℃反应搅拌一个小时后，使其自然缓慢升温到室温。用饱和的氯化铵水溶液淬灭反应，用乙醚萃取。合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。将有机相浓缩，使用柱层析分离得到纯的目标产物。含卤原子手性的天然产物的产率为15％。

含卤原子手性的天然产物的核磁数据具体如下：

实施例30

本实施例的含卤原子手性的天然产物的合成路线如下所示：

本实施例的含卤原子手性的天然产物的合成过程具体如下：

(1)将2摩尔当量的三氯化铝在手套箱里面称量好放入一个装有搅拌子的反应瓶中。在常温下，往反应瓶中加入新蒸制的DCM，然后加入1摩尔当量的化合物1。将反应瓶置于冰水混合物中使其温度降至0℃，往反应液中滴入3摩尔当量的二异丙基乙胺。滴加完成后，挪走冰浴，在常温下搅拌15分钟。然后将反应体系重新置入冰浴中，滴入1.2摩尔当量的化合物2，使反应体系自然升到室温，用TLC监测反应进程。等反应结束以后，向反应液中加入等量的DCM稀释，然后缓慢加入冰水淬灭反应，得到悬浊液。向反应体系的悬浊液中加入1mol/L的盐酸水溶液，直到反应体系中悬浊的固体消失。将有机层分离出来，水相用DCM再萃取两遍。合并有机相，有机相依次用饱和氯化钠溶液洗涤、无水硫酸钠干燥、浓缩，然后使用柱层析分离，淋洗液为PE/EA＝10:1(体积比)，得到纯的含卤原子手性中心的化合物。含卤原子手性中心的化合物的产率为90％，dr值为5:1，ee值为96％。

(2)将含卤原子手性中心的化合物(1.5g,4.22mmol,1equiv.)溶在经过钠干燥的无水四氢呋喃(40mL)中，在-40℃的温度下缓慢滴加1.2当量的溶于四氢呋喃的氢化铝锂(2.1mL,5mmol,1.2equiv.,2.4M/L in THF)。大约反应20分钟之后，在-40℃的温度下，滴加1M/L的盐酸水溶液，将反应液的pH调至中性。将反应液升至室温，加入饱和的酒石酸钾钠水溶液淬灭。将有机层分离出来，水相用乙酸乙酯再萃取两遍。合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。将有机相浓缩后直接用于下一步。

(3)将上述步骤(2)得到的产物溶于DCM(40mL)之中，在0℃的温度下，缓慢分批加入2当量的四溴化碳(2.8g,8.44mmol,2equiv.)和4当量的三苯基磷(4.43g,16.9mmol,4equiv.)。加料完成之后，将反应体系的温度升至室温，继续搅拌5分钟，直到TLC监测显示原料已经消耗完毕。直接旋干反应溶液，柱层析分离得到纯化后的化合物5。化合物5的产率为68％。

(4)将化合物5(1.33g)溶于DMF(15mL)之中，在0℃的温度下，缓慢加入4当量的亚磷酸二甲酯(1.2mL,12.61mmol,4equiv.)和5当量的三乙胺(2mL,15.7mmol,5equiv.)。在常温下继续搅拌10分钟，直到TLC监测显示原料已经消耗完毕。用饱和的氯化铵水溶液淬灭反应，用乙醚萃取。合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。将有机相浓缩，使用柱层析分离得到纯化后的化合物6。化合物6的产率为84％。

(5)将化合物6(548.6mg)溶于THF/H

(6)将反应后的产物(80mg)溶于乙酸乙酯中，在常温下加入两当量的高碘酸(100mg,0.42mmol,2equiv.)。在常温下搅拌两个小时以后，TLC监测显示原料已经消耗完毕。将有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。将有机相浓缩后直接用于下一步的反应。

(7)将2当量的磷酸酯(84mg,0.42mmol,2equiv.)溶在无水的乙腈(2mL)当中，在常温下加入1.2当量的二异丙基乙胺(41.5μL,0.252mmol,1.2equiv.)和1.5当量的氯化锂(13.35mg,0.315mmol,1.5equiv.)。反应的混合物在常温下搅拌一个小时以后，将上述步骤(6)得到的产物溶于乙腈当中，在0℃的温度下滴加到反应体系之中。在0℃搅拌5分钟之后，挪至室温继续搅拌7小时。TLC监测显示原料已经消耗完毕。用饱和的氯化铵水溶液淬灭反应，用乙酸乙酯萃取。合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。将有机相浓缩，使用柱层析分离得到纯化后的化合物7。化合物7的产率为46％。

(8)将化合物7(100mg)溶于甲苯(1mL)当中，在常温下加入5当量的Petasis试剂(4.3ml,1.5mmol,0.35M/L in toluene)。将反应体系的温度升至70℃，搅拌3小时后，TLC监测显示原料已经消耗完毕。用饱和的氯化铵水溶液淬灭反应，用乙酸乙酯萃取。合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。将有机相浓缩，使用柱层析分离得到纯的目标产物，产率为35％。

本实施例制备的含卤原子手性的天然产物的核磁数据为：

实施例31

本实施例的含卤原子手性的天然产物的合成路线与实施例30的合成路线相同，本实施例的合成过程与实施例30的合成过程相似，区别在于，步骤(7)不同，本实施例的步骤(7)中未加入乙腈。

实施例32

本实施例的含卤原子手性的天然产物的合成路线与实施例30的合成路线相同，本实施例的合成过程与实施例30的合成过程相似，区别在于，步骤(7)不同，本实施例的步骤(7)中，反应条件为在室温下进行12h过夜反应。DIPEA和化合物6的摩尔比为1:1，氯化锂和化合物6的摩尔比为1:1，磷酸酯和化合物6的摩尔比为1.2:1。

实施例33

本实施例的含卤原子手性的天然产物的合成路线与实施例30的合成路线相同，本实施例的合成过程与实施例30的合成过程相似，区别在于，步骤(7)不同，本实施例的步骤(7)具体如下：

将3当量的NaH(0.35g,9mmol,3equiv.)经过正己烷洗涤预处理之后，加入甲苯(20mL)。将反应体系冷却至0℃，将5当量的磷酸酯(3.4g,15mmol,5equiv.)溶于甲苯(8mL)中缓慢滴加至反应体系当中。在0℃下搅拌一个小时之后，将反应体系的温度降至-78℃，将上述步骤(6)得到的产物溶于甲苯后缓慢滴加至反应体系之中，使反应体系缓慢升至0℃(大约6个小时)，TLC监测显示原料已经消耗完毕。向反应体系中加入5％的乙酸水溶液淬灭，用正己烷萃取三次。合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。将有机相浓缩，使用柱层析分离得到纯化后的化合物7。

实施例34

本实施例的含卤原子手性的天然产物的合成路线与实施例33的合成路线相同，本实施例的合成过程与实施例33的合成过程相似，区别在于，步骤(7)不同，本实施例的步骤(7)具体如下：

将3当量的NaH(0.35g,9mmol,3equiv.)经过正己烷洗涤预处理之后，加入甲苯(20mL)。将反应体系冷却至0℃，将5当量的磷酸酯(3.4g,15mmol,5equiv.)溶于甲苯(8mL)中缓慢滴加至反应体系当中。在0℃下搅拌一个小时之后，将反应体系的温度降至-40℃，将上述步骤(6)得到的产物溶于甲苯后缓慢滴加至反应体系之中。使反应体系缓慢升至0℃(大约4个小时)，TLC监测显示原料已经消耗完毕。向反应体系中加入5％的乙酸水溶液淬灭，用正己烷萃取三次。合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。将有机相浓缩，使用柱层析分离得到纯化后的化合物7。

实施例35

本实施例的含卤原子手性的天然产物的合成路线与实施例34的合成路线相同，本实施例的合成过程与实施例34的合成过程相似，区别在于，步骤(7)不同，本实施例的步骤(7)中用乙腈代替甲苯。

实施例36

本实施例的含卤原子手性的天然产物的合成路线与实施例33的合成路线相同，本实施例的合成过程与实施例33的合成过程相似，区别在于，步骤(7)不同，本实施例的步骤(7)具体如下：

将1当量的DBU和1.2当量的NaI加入甲苯中(20mL)。将反应体系冷却至0℃，将1.2当量的磷酸酯溶于甲苯(8mL)中缓慢滴加至反应体系当中。在0℃下搅拌一个小时之后，将反应体系的温度降至-78℃，将上述步骤(6)得到的产物溶于甲苯后缓慢滴加至反应体系之中，使反应体系缓慢升至0℃(大约6个小时)，TLC监测显示原料已经消耗完毕。向反应体系中加入5％的乙酸水溶液淬灭，用正己烷萃取三次。合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。将有机相浓缩，使用柱层析分离得到纯化后的化合物7。

实施例37

本实施例的含卤原子手性的天然产物的合成路线与实施例33的合成路线相同，本实施例的合成过程与实施例33的合成过程相似，区别在于，步骤(7)不同，本实施例的步骤(7)具体如下：

将1.2当量的n-BuLi加入甲苯中(20mL)。将反应体系冷却至0℃，将2当量的磷酸酯溶于甲苯(8mL)中缓慢滴加至反应体系当中。在0℃下搅拌一个小时之后，将反应体系的温度降至-78℃，将上述步骤(6)得到的产物溶于甲苯后缓慢滴加至反应体系之中，使反应体系缓慢升至0℃(大约6个小时)，TLC监测显示原料已经消耗完毕。向反应体系中加入5％的乙酸水溶液淬灭，用正己烷萃取三次。合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。将有机相浓缩，使用柱层析分离得到纯化后的化合物7。

实施例38

本实施例的含卤原子手性的天然产物的合成路线与实施例37的合成路线相同，本实施例的合成过程与实施例37的合成过程相似，区别在于，步骤(7)不同，本实施例的步骤(7)中，n-BuLi和化合物6的摩尔比为2:1，磷酸酯和化合物6的摩尔比为4:1。

实施例39

本实施例的含卤原子手性的天然产物的合成路线与实施例33的合成路线相同，本实施例的合成过程与实施例33的合成过程相似，区别在于，步骤(7)不同，本实施例的步骤(7)具体如下：

将2当量的t-BuONa加入甲苯中(20mL)。将反应体系冷却至0℃，将4当量的磷酸酯溶于甲苯(8mL)中缓慢滴加至反应体系当中。在0℃下搅拌一个小时之后，将反应体系的温度降至-78℃，将上述步骤(6)得到的产物溶于甲苯后缓慢滴加至反应体系之中，使反应体系缓慢升至0℃(大约6个小时)，TLC监测显示原料已经消耗完毕。向反应体系中加入5％的乙酸水溶液淬灭，用正己烷萃取三次。合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。将有机相浓缩，使用柱层析分离得到纯化后的化合物7。

实施例40

本实施例的含卤原子手性的天然产物的合成路线与实施例39的合成路线相同，本实施例的合成过程与实施例39的合成过程相似，区别在于，步骤(7)不同，本实施例的步骤(7)中，用四氢呋喃代替甲苯。

以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。