一种用于治疗非哺乳期乳腺炎的中药制剂及其制备方法

摘要

本发明公开一种用于治疗非哺乳期乳腺炎的中药制剂，取下述重量配比的主要原料制备而成：柴胡、黄芩、香附、蒲公英、连翘、瓜蒌、栀子、僵蚕、猪苓、茯苓。本发明还公开一种用于治疗非哺乳期乳腺炎的制备方法，包括如下步骤：（1）将配方量的僵蚕、茯苓、猪苓粉碎，制成粉，加入乙醇提取两次，过滤，收集第一提取液；（2）将配方量的连翘切片，用水蒸气蒸馏法提取其挥发油，收集为第二提取液；（3）将配方量的柴胡、黄芩、香附、蒲公英、瓜蒌、栀子混合后加入足量的蒸馏水，煎煮过筛，得第三提取液；本发明能够有效的提取药物的有效成分，冲泡的方式服用更为方便，治疗非哺乳期乳腺炎临床疗效较传统的疏肝散结汤煎剂，临床疗效更优。

说明书

技术领域

本发明属于中医药技术领域，具体涉及一种具有清热解毒、疏肝散结，用于治疗非哺乳期乳腺炎的中药制剂及其制备方法。

背景技术

非哺乳期乳腺炎是一组非哺乳期乳腺炎症的统称，随着发病率的逐年升高，非哺乳期乳腺炎逐渐进入了公众的视线。非哺乳期乳腺炎具有病程长、易反复、对乳房外形影响较大的特点，被称为炎症中的癌症。根据其病理特点，常见的类型为浆细胞性乳腺炎及肉芽肿性乳腺炎，前者病理特点为大导管周围的炎细胞浸润，后者病理特点为终末导管小叶肉芽肿性炎。但两者于临床往往很难区分清楚，甚至混杂出现，患者同时出现大导管炎症及周围乳腺小叶的肉芽肿性变，尤其是当肿块较大时，病理可同时有大导管周围的炎细胞浸润及终末导管小叶肉芽肿性炎。目前非哺乳期乳腺炎的治疗主要为手术治疗和保守治疗为主，手术切除虽能取得一定疗效，但需一定的手术时机，且对乳房损毁严重，大部分患者仍倾向于保守治疗。药物保守治疗主要为西药和中药两种，西药的治疗主要以针对病因的抗炎和调节免疫为主，而糖皮质激素因其强大的抗炎和调节免疫作用而被作为常用药物。中药治疗，在明确临床疗效的情况下，也被证实了具有抗炎及调节免疫的作用。

非哺乳期乳腺炎中医学称之为粉刺性乳痈，通常认为肝经蕴热、气血瘀滞、痰瘀互结为其发病机理。倪毓生教授认为非哺乳期乳腺炎的发生、发展与肝胃密切相关。本病病程冗长，初期肝气郁结、胃气壅滞，而后肝郁化火、痰瘀郁而化热，热胜肉腐，是“阴转阳”的过程。经临床观察证实，非哺乳期乳腺炎患者常表现出一派肝胃郁热，痰瘀互结的证候群：性情急躁易怒、经前乳胀、胸闷不舒、口干多饮、口苦口臭，或口舌生疳、大便秘结、小便色黄，易生痤疮，舌质偏红、苔薄黄或黄腻，脉象弦细滑等。其经验方疏肝散结汤临床使用多年，疗效显著。方中柴胡、香附疏肝解郁，瓜蒌活血化瘀，蒲公英、黄芩、山栀、连翘清肝胃之实火，加猪茯苓、僵蚕健脾化痰利水、消肿散结。全方疏肝行气、清胃泻热、消肿散结。

发明内容

发明目的：针对现有技术中存在问题或不足，本发明提供一种用于治疗非哺乳期乳腺炎的中药制剂及其制备方法。

为实现上述发明目的，本发明的实施例提供了一种用于治疗非哺乳期乳腺炎的中药制剂，其特征在于，取下述重量配比的主要原料制备而成：柴胡10g、黄芩10g、香附10g、蒲公英30g、连翘10g、瓜蒌10g、栀子10g、僵蚕10g、猪苓10g、茯苓10g。

本发明的实施例还提供了一种用于治疗非哺乳期乳腺炎的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将配方量的僵蚕、茯苓、猪苓粉碎，制成僵蚕粉、茯苓粉、猪苓粉，加入65％～90％乙醇提取两次，每次2～3小时，过滤，收集第一提取液；

(2)将配方量的连翘切片，用水蒸气蒸馏法提取其挥发油，收集为第二提取液；

(3)将配方量的柴胡、黄芩、香附、蒲公英、瓜蒌、栀子混合后加入足量的蒸馏水，煎煮30～60分钟，过80目筛，得第三提取液；

(4)将步骤(1)所得第一提取液和步骤(2)所得第二提取液加入步骤 (3)制得的第三提取液内，采取柜式减压干燥器减压干燥法，制得干燥药粉；

(5)利用中药超微粉碎机将步骤(4)所得药粉进一步粉碎成100目以上的细粉；

(6)在臭氧浓度50g/m

优选的，步骤(5)中制得的细粉要求：100％过100目筛，95％过120目筛。

优选的，所述步骤(1)、步骤(2)和步骤(3)中柴胡、黄芩、香附、连翘、瓜蒌、栀子、僵蚕、猪苓、茯苓的重量相同，蒲公英的重量为其他任意材料重量的3倍。

本发明的上述技术方案的有益效果如下：

(1)本发明的一种用于治疗非哺乳期乳腺炎的中药制剂及其制备方法能够有效的提取药物的有效成分，冲泡的方式服用更为方便，治疗非哺乳期乳腺炎临床疗效较传统的疏肝散结汤煎剂，临床疗效更优。

(2)本发明的一种用于治疗非哺乳期乳腺炎的中药制剂相对于本院传统方疏肝散结汤减少了药味、降低了成本，所达到的效果比传统的疏肝散结汤更佳，市场价值更高。

(3)本发明的一种用于治疗非哺乳期乳腺炎的中药制剂的制备方法对不同种类的药材进行分类，并采用对不同方式来提取有效液，柜式减压干燥器减压干燥法，制得干燥药粉，更大程度的减少了不同药材有效成分流失。

(4)本发明的中所采用的柴胡，有疏肝解郁、活血止痛、消肿生肌的作用，其提取物能够镇痛、消炎、升高白细胞，促进肉芽生长。所采用的黄芩，具有清热泻火解毒的功效。其有效成分具有抑菌、抗炎、解热、抗过敏的作用。所采用的香附具有疏肝解郁的功效，其有效成分具有镇痛作用，适用于肝郁气滞引起的乳房疼痛。所采用的连翘，有清热解毒、消肿散结的功效，现代药理研究表明连翘具有抑菌、抗炎、免疫调节、抗氧化等作用。所采用瓜蒌，有清热涤痰、宽胸散结的功效，其有效成分具有抑菌的作用。所采用的栀子：功用清热利湿、凉血解毒、消肿止痛。其水提取物有效成分具有解热、抗菌、抗炎、镇静、镇痛、调节免疫的作用。所采用的僵蚕具有化痰散结、祛风止痛的功效。其醇水浸出液有效成分具有镇静、抗炎、抑菌的作用。所采用的猪苓，具有利水渗湿的功效，其水提物和醇提物分别具有调节免疫和抑菌作用。所采用的茯苓具有利水渗湿的功效，其醇提物具有镇静利尿、调节免疫的作用。所采用的蒲公英具有清热解毒，消肿散结、利湿通淋的作用，其有效成分具有抗菌、增强免疫的作用。

附图说明

图1为本发明的实施例中XSGSJT对大鼠局部红肿有明显的治疗作用图。

其中，图1A为大鼠建模后，对照组、模型组、XSGSJT高剂量组和XSGSJT 低剂量组乳头情况对比图；图1B为在NPM模型中，对照组、模型组、XSGSJT 高剂量组和XSGSJT低剂量组HE染色结果图。

图2为本发明的实施例中XSGSJT抑制了CD138、IL-6、EGFR、ESR1 和NOS3在大鼠乳腺组织中的表达图。其中，图2A为对照组、模型组、XSGSJT 高剂量组和XSGSJT低剂量组大鼠乳腺组织CD138表达图。图2B-2E为对照组、模型组、XSGSJT高剂量组和XSGSJT低剂量组所检测到大鼠乳腺组织中的IL-6、EGFR、ESR1和NOS3表达图。图2F为对照组、模型组、XSGSJT 高剂量组和XSGSJT低剂量组中IL-6和EGFR表达情况图。

图3为本发明的实例中XSGSJT逆转乳腺炎模型诱导激活的IL-6/STAT3 信号通路图。其中，图3A-图3F为对照组、模型组、XSGSJT高剂量组和XSGSJT 低剂量组的IL-6和EGFR、p-JAK2、p-STAT3、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3 的表达情况图。

具体实施方式

为使本发明要解决的技术问题、技术方案和优点更加清楚，下面将结合具体实施例进行详细描述。

本实施例中，以下为缩写的释义：XSGSJT(本发明制剂、新疏肝散结汤)； SGSJT(传统的疏肝散结汤)；NPM(非哺乳期乳腺炎)。

本发明的药剂方(柴胡、黄芩、香附、连翘、瓜蒌、栀子、僵蚕、猪苓、茯苓各10g、蒲公英30g)由本院传统方疏肝散结汤(柴胡、制香附、没药、黄芩、栀子、银花、连翘、青皮、陈皮各10g，瓜蒌、丹参、猪苓、茯苓、炙僵蚕各15g，生牡蛎60g，蒲公英、生麦芽各30g)化裁而来，应用本发明所制备方法能够有效的提取各种药物的有效成分，服用更为方便，回顾性数据分析显示，治疗非哺乳期乳腺炎临床疗效较传统疏肝散结汤煎剂，临床疗效更优。

一般资料：回顾性研究纳入南通市中医院2017～2020年门诊及住院非哺乳期乳腺炎患者共计164人，其中新疏肝散结汤组(XSGSJT)84人和疏肝散结汤(SGSJT)组80人，两组一般资料(年龄、发病时间、病理类型)无统计学差异，具有可比性。

表中，PCM就是浆细胞性乳腺炎，GLM是肉芽肿性乳腺炎，是非哺乳期乳腺炎的两种典型类型，t是T检验的值，χ2是卡方检验的值，P为检验的结果，P＞0.05，没有差异。

从上表可见，本发明的实施例中选取84人以新疏肝散结汤进行治疗，80 人疏肝散结汤进行治疗，其中，发病的平均时间接近，其中，新疏肝散结汤组中，病理为PCM的人数为53人，病理为GLM的人数为31人；疏肝散结汤组中，病理为PCM的人数为50人，病理为GLM的人数为30人。

实施例1

SGSJT组患者服用疏肝散结汤(柴胡、制香附、没药、黄芩、栀子、银花、连翘、青皮、陈皮各10g，瓜蒌、丹参、猪苓、茯苓、炙僵蚕各15g，生牡蛎 60g，蒲公英、生麦芽各30g，由南通三越药业提供，同一批次中药)，每日1 剂，煎至300ml，早晚各服一半，直至痊愈。

XSGSJT组服用本发明制剂新疏肝散结汤(柴胡10g、黄芩10g、香附10g、蒲公英30g、连翘10g、瓜蒌10g、栀子10g、僵蚕10g、猪苓10g、茯苓10g)，每日1剂，温开水冲调至300ml，早晚各服一半，直至痊愈。

实施例2统计方法

观察指标：(一)临床症状体征积分：①肿块大小：由同一超声科医生测得超声下肿块最长径值，多个肿块时计算长径之和，长径≤3cm为1分，3cm ＜长径≤6cm为2分，6cm＜长径≤9cm为3分，长径＞9cm为4分；②肤色：以资深专家选取正常肤色、稍红、红色、鲜红各一例，征得患者同意后留取照片，以此为标准判定肤色，分别记1-4分；③肤温：以同一型号额温枪测量红肿部位及周围正常部位温度，温度等同为1分，高出温度≤1℃为2分，1℃＜高出温度≤2℃为3分，高出温度＞2℃为4分；④疼痛：无疼痛为1分，偶有疼痛且疼痛轻微为2分，偶有疼痛但疼痛较剧或轻度疼痛持续发作为3分，持续较剧疼痛为4分。数据于入组时及治疗完成后各统计一次。

(二)White blood cells(WBC)、C-reactive protein(CRP)：在入组时、治疗一月后各检测一次。所有患者入院后清晨空腹抽取静脉血。

(三)痊愈时间：从治疗开始至超声下痊愈的时间。

(四)复发率：痊愈后半年复发率。

采用SPSS20.0对数据统计分析。对符合正态分布的数据，计量资料以 (x±s)表示，组间采用独立样本t检验，组内采用配对样本t检验，计数资料采用2检验；不符合正态分布数据采用非参数检验，计量资料采用M (P25-P75)表示。以P<0.05表示差异显著。

结果：XSGSJT组较SGSJT组能更有效迅速的改善患者局部红肿热痛症状(表一)，改善炎症相关实验室指标(表二)，治愈时间缩短，复发率更低(表三)。

表一 XSGSJT组与SGSJT组治疗后患者局部红肿热痛症表

非哺乳期乳腺炎的临床表现就有红肿热痛，表一为根据临床症状体征积分方法对治疗前后，XSGSJT组和SGSJT组对肿块大小、肤色肤温，疼痛等指标的评测表，可见，采用不同药方治疗后，XSGSJT组肿块缩小更明显，肤色肤温趋于正常、疼痛减轻，采用本发明药剂的XSGSJT组，相对于SGSJT组，治疗效果更加，Z是Z检验的统计量，P是对结果的判定，P<0.05，差异有统计学意义。

表二 XSGSJT组与SGSJT组患者改善炎症相关实验室指标表

所有患者入院后清晨空腹抽取静脉血，在入组时、治疗一月后各检测一次；从表二为White blood cells(WBC)、C-reactive protein(CRP)数据，从表二 可见，治疗后，XSGSJT组相对于SGSJT组患者的白细胞和C反应蛋白值更低，炎症改善更加明显，t是t检验的统计量，P是对结果的判定，P<0.05，差异有统计学意义。

表三 XSGSJT组与SGSJT组患者治愈时间及复发率情况表

从表三可见，XSGSJT组的平均痊愈时间在45.42±22.56天，而SGSJT组的痊愈时间在60.81±35.79，XSGSJT组相对于SGSJT组的痊愈时间更短； XSGSJT组的复发率在复发率较低，t是t检验的统计量，χ2是χ2检验的统计量，P是对结果的判定，P<0.05，差异有统计学意义。

实施例3动物实验：

为了更客观的证实本发明制剂的疗效及进行毒理实验，本发明进行的大鼠实验。

实验方法：

实验选取了SD大鼠，通过皮下注射经病理证实的非哺乳期乳腺炎患者手术切除的组织制作的组织匀浆接种物建立大鼠乳腺炎模型，对模型大鼠给予 XSGSJT低剂量(0.018mL/g)和XSGSJT高剂量(0.036mL/g)。

结果如下：

(一)XSGSJT对大鼠局部红肿有明显的治疗作用。由图1A可见，大鼠建模后对照组乳头呈正常状态，模型组乳头出现红肿病变，乳房周围有小硬肿块。建模3周后，乳头宏观有明显炎症。经XSGSJT治疗后，两种乳腺炎模型的乳头均有所改善，乳头红肿现象消失，乳头恢复正常乳白色，乳房周围皮下小硬块消失。此外，与XSGSJT低剂量组相比，XSGSJT高剂量组具有更显著的效果。这部分结果表明，一周后，XSGSJT对NPM局部红肿有明显的治疗作用。

通过HE染色验证了上述结果。可以观察到，在NPM模型中，小叶有淋巴细胞浸润，球内导管消失，间质毛细血管周围的淋巴细胞浸润程度不同。炎症性肉芽肿性病变沿乳腺小叶分布，部分病变融合，小叶内腺导管减少或消失 (图1B)。低剂量XSGSJT治疗后，炎症得以减轻，但与对照组相比仍有炎症，并发生了细胞核聚集的现象。此外，高剂量组的炎症显著减少，导管炎症得到缓解(图1B)，这表明XSGSJT可能导致两种乳腺炎模型中的炎症减少。

(二)XSGSJT抑制了CD138、IL-6、EGFR、ESR1和NOS3在大鼠乳腺组织中的表达。已知血浆细胞来自B淋巴细胞，慢性乳腺炎中存在大量B淋巴细胞接下来，本发明使用免疫组织化学来检测CD138的表达，这是浆细胞的特异性指标。发现模型组大鼠乳腺组织CD138表达高度增加，低剂量 XSGSJT治疗后下降，高剂量组表达低于低剂量组(图2A)。本发明的发明人之前基于网络的药理学研究发现，IL-6、EGFR、ESR1、NOS3是XSGSJT在 PCM治疗中的关键靶点，因此检测到大鼠乳腺组织中的IL-6、EGFR、ESR1 和NOS3表达，并在模型建立后显示IL-6、EGFR、ESR1、NOS3表达升高 (p<0.05，图2B-图2E)，表达随着XSGSJT剂量的增加而降低，其中ESR1 和NOS3表达下降较少(图2B-图2E)。因此，本发明仅通过免疫组织化学验证了大鼠乳腺组织中IL-6和EGFR的表达。结果，乳腺炎模型促进IL-6和EGFR 表达，随着XSGSJT剂量的增加，IL-6和EGFR受抑制(图2F)。

(三)XSGSJT逆转乳腺炎模型引起的IL-6/STAT3通路的激活

随后，确定了与STAT3通路相关的蛋白表达。首先，模型组的IL-6和EGFR 上调，低剂量和高剂量组的下调(p<0.001，图3A-3B)。同样，建模诱导p-JAK2、 p-STAT3、p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3的表达，并在低剂量和高剂量 XSGSJT治疗后减少(p<0.01，如图3C-图3F所示)，表明XSGSJT可以逆转乳腺炎模型引起的IL-6/STAT3通路的激活。

(四)该实验过程中未见大鼠不良反应发生。

以上所述是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明所述原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。