携带2型BVDV-Erns基因的高繁殖力猪瘟弱毒标记疫苗的构建方法

摘要

本发明涉及生物技术领域，旨在提供一种携带2型BVDV‑Erns基因的高繁殖力猪瘟弱毒标记疫苗的构建方法。本发明利用分子克隆及反向遗传方法，将BVDV2‑890#毒株的Erns基因和CSFV流行毒株QZ14的E2基因VR1区置换CSFV‑C株相应的基因片段，并引入7个特定的突变位点，得到了重组病毒rC‑Marker2。获得的重组病毒带有分子标记(BVDV2 Erns)，猪瘟病毒2型流行毒株的VR1以及特定的突变位点，为开发适应体外细胞培养体系的标记疫苗奠定了基础。应用该技术构建的重组嵌合猪瘟病毒弱毒标记疫苗株，能够通过血清学方法判断猪瘟病毒抗体阳性的猪是由于疫苗接种还是野毒感染引起；对当前流行的基因2型猪瘟病毒有较好的中和效果；在体外细胞培养系统中表现出良好的生长能力，可以降低疫苗的生产成本。