一种橡胶草遗传转化方法

摘要

本发明提供一种橡胶草遗传转化方法,包括:(1)取新疆橡胶草种质的幼嫩叶片,切割处理,放于:MS+1.5～1.6mg/L6‑BA+0.1mg/LNAA+20g/L蔗糖,pH5.8芽诱导培养基中培养；50天后,挑选出适宜组培的橡胶草优异种质；转至:1/2MS+20g/L蔗糖,pH5.8的生根培养基,成为再生橡胶草组培幼苗；(2)取幼苗叶片切割处理,在芽诱导培养基上预培养2天；(3)加入农杆菌侵染液浸染后,转至芽诱导培养基中,黑暗共培养3天；转至含400mg/L Car的芽诱导培养基培养一周；转至MS+1.5～1.6mg/L 6‑BA+0.1mg/L NAA+20g/L蔗糖+400mg/L Car和8～10mg/L Hyg,pH5.8筛选培养基上,诱导抗性芽的再生；转至1/2MS+20g/L蔗糖+400mg/L Car和8～10mg/L Hyg,pH5.8新的生根培养基上,得到橡胶草抗性再生植株；本发明的橡胶草遗传转化方法,抗性再生芽诱导率>30％,转基因再生苗植株畸形率低,对转基因橡胶草阳性检出率>90％。