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肝豆状核变性斑马鱼模型的建立方法

摘要

本发明公开了肝豆状核变性斑马鱼模型的建立方法,包括下列步骤:将gRNA靶点序列设计在斑马鱼ATP7B基因外显子2编码的氨基酸结构域上,合成引物;以pMD19‑gata5_gRNA scaffold载体为模板,使用引物制备gRNA体外转录模板进行体外转录、纯化回收获得gRNA;将gRNA和Cas9 mRNA注射入单细胞期斑马鱼胚胎,培养筛选从而获得ATP7B突变斑马鱼,本发明用于模拟肝豆状核变性疾病特征。

著录项

  • 公开/公告号CN109880827B

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2021-05-18

    原文格式PDF

  • 申请/专利号CN201910233705.0

  • 发明设计人 芈肖肖;严健;施军平;

    申请日2019-03-26

  • 分类号C12N15/113(20100101);C12N15/90(20060101);A01K67/027(20060101);

  • 代理机构53113 昆明合众智信知识产权事务所;

  • 代理人钱磊

  • 地址 310000 浙江省杭州市拱墅区温州路126号

  • 入库时间 2022-08-23 11:49:09

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