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基于模板材料合成长度固定和特定末端序列DNA文库的方法

摘要

本发明涉及生物领域,具体提供一种基于模板材料合成固定长度和特定末端序列DNA文库的方法,所述方法包括:片段化双链DNA的获取;DNA末端修复与3’端加尾;3’Biotin修饰的A1接头的连接;连接产物的纯化;DNA固定在有链霉亲和素的固相上;双链DNA变性为单链;引物1杂交;使用脱氧核糖基团3’端羟基具有可逆的化学修饰的dNTPs延伸碱基;五碳糖3’端羟基恢复;固定长度的DNA延伸;5’末端修平;末端序列的选择;末端序列的去除;用于分子克隆的接头的连接。本发明方法能够方便地进行无参考基因组、序列变异性高的区域固定长度和特定末端序文库构建,大幅降低了文库构建成本。

著录项

  • 公开/公告号CN110158157B

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2021-02-02

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 浙江大学;

    申请/专利号CN201810150519.6

  • 发明设计人 贾俊岭;潘辰;李然;

    申请日2018-02-13

  • 分类号C40B50/06(20060101);C12N15/10(20060101);

  • 代理机构11323 北京市隆安律师事务所;

  • 代理人刘东方

  • 地址 310058 浙江省杭州市余杭塘路866号浙江大学紫金港校区

  • 入库时间 2022-08-23 11:31:00

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