基于FRET效应探测细胞凋亡过程的方法

摘要

本发明提供一种基于FRET效应来探测细胞凋亡过程的方法，其主要步骤是：制备具有长寿命的磷光铱配合物作为给体D，制备短寿命有机荧光小分子化合物作为受体A，D和A两者之间存在FRET效应；通过生物正交反应，将给体D和受体A分别连接到能够被仅存在于细胞凋亡过程中的caspase酶剪切的肽链的两端，构成D‑A型探针，所述D‑A型探针可以在细胞外组装构成然后植入到细胞内部，也可以直接在细胞内组装；利用共聚焦成像或寿命成像技术，检测D‑A型探针当中给体D或受体A的寿命变化，从而判断细胞的凋亡进程。本发明可应用于细胞凋亡各个阶段，能够分辨细胞凋亡的各个时期，在细胞成像、生物标记和传感领域等方面具有非常重要的应用前景。