一种以活性形式表达的谷氨酰胺转氨酶突变体

摘要

本发明公开了一种以活性形式表达的谷氨酰胺转氨酶突变体，属于酶工程和发酵工程领域。本发明通过对谷氨酰胺转氨酶成熟区进行定点突变，改变谷氨酰胺转氨酶活性位点附近的氨基酸残基，提高谷氨酰胺转氨酶的催化效率，得到了谷氨酰胺转氨酶酶活的进一步提高的重组菌hpro‑E300W。重组菌hpro‑E300W发酵罐发酵酶活可达59.85U/mL，是目前报道的发酵水平的最高值。此外，本发明通过在谷氨酰胺转氨酶中插入解脂耶氏酵母内源性蛋白酶Kex2识别位点现了谷氨酰胺转氨酶在解脂耶氏酵母中的活性表达。发酵生产杂蛋白少，纯化简单，可降低工业化生产谷氨酰胺转氨酶的成本。