基于酶切循环放大的石墨烯氧化物-DNA传感器的制备方法和在检测凝血酶上的应用

摘要

本发明属于生物医学领域中的蛋白质检测领域，具体涉及一种基于酶切循环放大的石墨烯氧化物‑DNA传感器及其检测凝血酶的方法。主要包括：1)制备石墨烯氧化物；2)把FAM标记的TBA核酸适配体加入到氨基活化的石墨烯氧化物上；3)加入不同浓度的凝血酶，通过石墨烯氧化物表面吸附的核酸适配体标记荧光的强度的变化，进行检测。本发明利用石墨烯氧化物淬灭荧光的特性，采用核酸外切酶Ⅲ识别凝血酶单链核酸适配体(TBA)，将其水解释放凝血酶，从而实现凝血酶循环利用，荧光信号逐渐增强，能高灵敏度、快速、低成本地实现凝血酶的微量检测，通过共价结合和加入聚乙二醇的方法避免非特异性吸附，将石墨烯氧化物‑核酸适配体传感器对凝血酶检测限提高至0.024pM。