一种提高乙醇产率的酿酒酵母定点饱和突变基因spt15-N及其应用

摘要

本发明提出了一种提高乙醇产率的酿酒酵母spt15定点饱和基因突变方法。它是利用基因工程手段得到酿酒酵母的spt15定点饱和突变基因，并连接到表达载体pYES2NTc上,构建突变库，共得到了12个单点突变基因，与野生型基因spt15，spt3及对照基因Neo基因构建重组质粒，分别用醋酸锂法转入酿酒酵母INVSC1中，得到15个重组的酿酒酵母菌株。以葡萄糖为底物，将重组酿酒酵母接种发酵，测定其乙醇产率，其中重组酿酒酵母菌INVSC1‑SPT15‑M，INVSC1‑SPT15‑N，乙醇产率大幅度提高，分别为43.0±0.9g/L和43.7±0.2g/L。比对照菌株INVSC1‑Neo分别增加17.8％和19.7％。2个突变基因在127位分别由赖氨酸突变为甲硫氨酸和天冬酰胺。本发明方法简单，操作容易，乙醇产率提高效果明显。具有很好的经济效益和社会效益。