改良ATMT在构建深绿木霉T23△Crel中的应用

摘要

本发明公开了一种改良ATMT在构建深绿木霉T23ΔCrel中的应用；以深绿木霉T23的基因组DNA为模板，对crel基因序列进行PCR扩增，获得crel基因的上、下游侧翼序列；再分别导入敲除质粒pC1300qh的上、下游，形成重组质粒pC1300qh‑Δcrel；将重组质粒pC1300qh‑Δcrel转化大肠杆菌感受态，验证、筛选阳性克隆，提取重组质粒pC1300qh‑Δcrel，导入根癌农杆菌AGL1进行改良的ATMT转化，即可。本发明通过改良的ATMT转化技术成功构建了深绿木霉碳代谢抑制因子CRE1敲除突变株，该T23Δcrel菌株具有促进木霉菌细胞壁降解酶分泌及活性，间接提高木霉菌拮抗病原菌的功能。