稳定表达牛胰蛋白酶原的MDCK细胞系及其用途

摘要

本发明提供一株稳定分泌表达牛胰蛋白酶原(S.pro‑try)的MDCK工程细胞系，及其在培养流感病毒、生产流感病毒疫苗中的应用，属于生物技术领域。本发明还提供一种构建上述细胞系的方法，通过构建分泌型、胞内型、跨膜型3种亚细胞分布的牛胰酶原和牛胰酶表达基因序列的步骤，并瞬时转染MDCK筛选提高人流感病毒滴度的最佳表达模式。本发明所提供的细胞系，一方面为将来大规模流感疫苗生产奠定细胞基础，解决疫苗产能扩大和品质提高的关键问题；另一方面也可以作为实验室有效分离培养和监测流感病毒、抗流感病毒药物的筛选、中和抗体的测定等其他方面的研究工具，具有广泛的应用前景。