一种KAP13-1基因在绵羊毛纤维细度鉴定中的应用

摘要

本发明涉及一种KAP13‐1基因在绵羊毛纤维细度鉴定中的应用。根据牛KAP13‐1基因设计引物，以绵羊皮肤cDNA为模板，RT‐PCR绵羊KAP13‐1基因片段；根据绵羊KAP13‐1基因的氨基酸序列制备多克隆抗体，用免疫组化检测KAP13‐1基因在绵羊毛囊中表达量；(3)利用2A肽序列构建绵羊启动子驱动的共表达绵羊KAP13‐1和绿荧光蛋白的重组载体；以KAP13‐1基因和ZsGreen1‐1载体中绿荧光蛋白基因设计引物；融合PCR得到KAP13‐1‐2A‐ZSG，用连接酶将KAP13‐1‐2A‐ZSG连接到双酶切载体中；以绵羊脾脏基因组为模板扩增KAP11‐1基因启动子，酶切连接到中间载体中获重组载体(4)用重组载体转化昆明小鼠，鉴定转基因阳性小鼠毛纤维皮质部中的表达量，并检测距离毛囊底部130μm处毛纤维的直径。