一种基于自然转化的副猪嗜血杆菌高效遗传重组方法及应用

摘要

本发明公开了一种基于自然转化的副猪嗜血杆菌高效遗传重组方法及应用，属于细菌遗传改造技术领域。本发明中通过在上游引物中添加USS序列ACCGCTTG，使的PCR产物含有这个USS序列，副猪嗜血杆菌会识别并带入菌体内部进行重组，无需构建突变常用的自杀质粒，本方法把抗性基因直接引入到PCR产物中，直接用PCR产物就能实现筛选，同时在引物中引入USS，细菌就会直接吞噬这个重组模版用于同源重组。本发明的基于自然转化的副猪嗜血杆菌高效遗传重组方法在构建副猪嗜血杆菌双组分系统突变体中应用。