一种快速区分鸭甲肝病毒1型和3型PCR-HRM的引物和方法

摘要

本发明公开了一种快速区分鸭甲肝病毒1型和3型的PCR‑HRM引物和方法，该方法首先构建了DHAV‑1和DHAV‑3相应目的片段的质粒样品作为阳性质粒，然后从样品中提取病毒RNA并反转录为cDNA，再以cDNA为模板，利用所设计的特异性引物对cDNA进行PCR‑HRM扩增；对扩增产物进行HRM分析，确定病毒类型。本发明操作简单，只需在普通PCR反应之前加入荧光饱和染料；检测快速且高通量，整个操作过程需约3.5小时，即可完成96/384孔板的PCR产物检测，极大缩短了检测时间；费用低，不需要多条引物和特异性探针；敏感性高、特异性和重复性好，有利于在临床上的推广应用。