一种含有染料EvaGreen和双热启动酶的定量PCR方法

摘要

本发明涉及一种含有染料EvaGreen和双热启动酶的定量PCR方法，其特征在于包括如下步骤：(1)构建PCR反应体系，包括:待测样品；与所述待测样品中待测模板互补的正向引物和反向引物；荧光染料EvaGreen；及双热启动酶，包括HotStar Taq DNA聚合酶和Anti Taq DNA聚合酶；(2)在所述PCR反应体系中，对所述待测模板进行PCR扩增，以形成双链DNA‑EvaGreen荧光染料复合物；(3)PCR扩增过程之中或之后，检测所述PCR反应体系的荧光值，以确定扩增产物的数量，从而确定待测模板的数量。本发明的定量PCR方法具有高精确度、高效率、高灵敏度、高特异性且价格低廉的特点。