一种常温保存克氏原螯虾各组织蛋白质组学用蛋白样品的方法

摘要

本发明公布了一种常温保存克氏原螯虾各组织蛋白质组学用蛋白样品的方法，包括以下步骤：（1）称取克氏原螯虾新鲜组织放入预冷的研钵中剪碎，再用液氮充分研磨成粉末状，转移到15mL离心管中；（2）采用三氯乙酸/丙酮沉淀法提取蛋白收集沉淀；（3）用含0.02g/mL的CHAPS、10μL/mL的PMSF的浓度为9mol/L尿素溶解步骤（2）制得的沉淀，离心收集上清；（4）向步骤（3）获得的上清中加入10%（v/v）的甘油和10%（v/v）乙腈，调节pH至7.5-8.0，常温保存。本发明方法使克氏原螯虾蛋白样品可以在常温保存两周以上，在-20℃保存一年；不仅操作便捷，而且保真度高，不影响后续的液相色谱分离以及质谱分析等实验。