一种基于亚甲基蓝指示剂定量检测PCR的电化学安培检测法

摘要

本发明公开一种基于亚甲基蓝DNA指示剂技术定量检测PCR扩增产物的电化学安培电流测定方法，并将其应用于正常人线粒体实际样品的PCR产物定量检测，包括如下步骤：根据待测基因扩增片段进行PCR扩增所需引物的设计及合成，本发明以正常人线粒体基因序列为例；将经过预处理的玻碳电极放置于含有扩增标本的PCR反应体系，并在体系中加入一定量的DNA杂交指示剂亚甲基蓝；根据目标片段设定相应的PCR 反应条件，在进行扩增的同时，采用电化学电流-时间曲线法采集亚甲蓝的电流信号变化，实现PCR扩增产物的电化学检测。该法不仅选择性、灵敏度高，还实现了对PCR产物的定量检测，且与传统方法比较更为快捷、简便、经济。