靶核酸序列的扩增方法、使用该方法的突变检测方法、以及用于该方法的试剂

摘要

本发明提供一种能够在1个反应体系中灵敏度和可靠性优异地进行突变检测的突变检测方法。使用引物(Xmt)和(Xwt)，以与作为检测目标的碱基为正常型的靶核酸序列的扩增效率相比更高的扩增效率，来扩增作为检测目标的碱基为突变型的靶核酸序列。(Xmt)为与模板核酸中包含突变型碱基的区域互补、且3’区域具有与突变型碱基互补的碱基的引物，(Xwt)为与模板核酸中包含正常型碱基的区域互补、且3’区域具有与正常型碱基互补的碱基的引物。(Xmt)对突变型模板核酸的扩增效率优选高于(Xwt)对正常型模板核酸的扩增效率。并且，对显示所得到的扩增产物与探针的杂交产物的熔解状态的信号值进行测定，由与温度变化相伴的信号值变动来确定目标碱基位点有无突变。